La metilación de RAD18 por la metiltransferasa SETD6 atenúa las rupturas del ADN

Área de la Ciencia:

• Biología molecular
• La epigenética
• Mecanismos de reparación del ADN

Sus antecedentes:

• SETD6 es una metiltransferasa que contiene el dominio SET involucrada en modificaciones post-traduccionales.
• RAD18 es una proteína crucial en la vía de reparación del daño en el ADN.
• La metilación de proteínas regula la función, la estabilidad y las interacciones de las proteínas.

Objetivo del estudio:

• Investigar la interacción entre SETD6 y RAD18.
• Determinar si SETD6 metila el RAD18 y aclarar las consecuencias funcionales de esta modificación.
• Comprender el papel de la metilación RAD18 mediada por SETD6 en el mantenimiento de la integridad genómica.

Principales métodos:

• Tecnología de microarrays de proteínas para identificar los interactores.
• Los ensayos ELISA y de inmunoprecipitación confirman la interacción y la metilación.
• Espectrometría de masas y mutagénesis dirigida al sitio para identificar los sitios de metilación.
• Análisis de marcadores de daño del ADN (γH2AX) y ensayos de cometa en células knockout SETD6.

Principales resultados:

• RAD18 fue identificado como un interactor directo y sustrato de SETD6.
• RAD18 se somete a la mono metilación en los residuos K73 y K406 por SETD6.
• La metilación mediada por SETD6 influye en la localización nuclear de RAD18.
• El agotamiento de SETD6 conduce a un aumento de los marcadores de daño en el ADN y a rupturas en el ADN.

Conclusiones:

• La metilación mediada por SETD6 de RAD18 es esencial para atenuar las rupturas del ADN.
• Esta metilación regula la localización y la función celular de RAD18.
• SETD6 juega un papel crítico en el mantenimiento de la integridad genómica a través de la regulación de RAD18.