RcsB y H-NS Ambos contribuyen a la represión de la expresión del operón

Área de la Ciencia:

• Microbiología
• Biología molecular
• Genética bacteriana

Sus antecedentes:

• Los Curli fimbriae son esenciales para la formación de biopelículas en Escherichia coli.
• La expresión de curli fimbriae está estrechamente regulada por factores de transcripción y pequeños ARN reguladores (ARNs).
• El sistema de phosphorelay RcsD-RcsC-RcsB está involucrado en la respuesta al estrés de la envolvente y regula la expresión de las fimbrias rizadas.

Objetivo del estudio:

• Investigar el papel del regulador RcsB en el control transcripcional de csgD, un gen clave en la formación de biopelículas.
• Para aclarar el mecanismo por el cual RcsB influye en la expresión de csgD y la producción de curli fimbriae.
• Determinar el impacto de la fosforilación de RcsB en su afinidad de unión al ADN y su función reguladora.

Principales métodos:

• Análisis de huella de DNase-I para identificar los sitios de unión de RcsB en el promotor de csgD.
• Análisis de la expresión génica (estudios de sobreexpresión) para evaluar el efecto de RcsB y su mutante en la expresión de csgD.
• Evaluación de la formación de rizos y de la expresión del ARNr de RprA en diferentes condiciones de RcsB.

Principales resultados:

• RcsB se une directamente a la región promotora de csgD, lo que lleva a la represión transcripcional.
• La sobreexpresión de RcsB o de un mutante no fosforilable (RcsB D56A) redujo la expresión de csgD y la formación de rizos.
• RcsB regula positivamente la expresión de RprA sRNA, que inhibe la traducción de csgD.

Conclusiones:

• El sistema RcsBCD suprime la expresión de csgD a través de la represión transcripcional directa por RcsB.
• RcsB también media la represión traslacional de csgD a través de la inducción de RprA sRNA.
• La afinidad de unión al ADN de RcsB es en gran medida independiente de su estado de fosforilación.