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Updated: Sep 9, 2025
05:37
Single-Molecule Fluorescence Visualization of DNA Polymerase Dynamics at G-Quadruplexes
Published on: April 4, 2025
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8-Oxoguanina interrumpe la estabilidad del ADN G-cuadruplex y modula la unión al péptido FANCJ AKKQ
Laura Campbell1,2, Kaitlin Lowran2,3, Emma Cismas2
1Department of Biochemistry, University of Wisconsin-Madison, Madison, WI 53706, USA.
Molecules (Basel, Switzerland)
|August 28, 2025
Resumen
La helicasa FANCJ
Área de la Ciencia:
- Biología molecular
- La genética
- La bioquímica
Sus antecedentes:
- Las secuencias ricas en guanina forman estructuras G-cuadruplexas (G4).
- Las G4 pueden impedir la replicación y reparación del ADN.
- La helicasa FANCJ resuelve G4s, manteniendo la estabilidad del genoma.
Objetivo del estudio:
- Investigar el reconocimiento por parte de la FANCJ de los G4 modificados por 8-oxoguanina (8oxoG4s).
- Determinar cómo el contexto de la secuencia, la posición de la lesión y la estabilidad afectan la unión de FANCJ.
- Aclarar el papel del motivo FANCJ AKKQ en el reconocimiento de 8oxoG4.
Principales métodos:
- Se han sintetizado secuencias G4 con modificaciones de 8-oxoguanina.
- Se midieron las afinidades de unión al péptido G4 mediante espectroscopia de fluorescencia.
- Se evaluó la conformación y estabilidad de G4 mediante espectroscopia de dicroísmo circular.
Principales resultados:
- La afinidad de unión de FANCJ AKKQ varió con la posición de 8oxoG y el contexto de la secuencia.
- Las secuencias G4 específicas (por ejemplo, (GGGT) 4, (TTAGGG) 4) mostraron estabilidad y unión alteradas.
- Las condiciones de cloruro de potasio y cloruro de sodio modularon la estabilidad de G4 y la interacción de FANCJ.
Conclusiones:
- La unión de FANCJ a G4s y 8oxoG4s está influenciada por la ubicación del daño oxidativo.
- El entorno de secuencia local de las estructuras G4 afecta el reconocimiento de FANCJ.
- Estos hallazgos refinan los modelos del papel de FANCJ en la resolución de las estructuras dañadas de G4.
