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Desarrollo y aplicación de anticuerpos monoclonales CD2v derivados de ratones contra el virus de la peste porcina africana a partir de células B individuales
- Litao Yu 1, Fangtao Li 1, Xingqi Zou 1, Lu Xu 1, Junjie Zhao 1, Yan Li 1, Guorui Peng 1, Yingju Xia 1, Qizu Zhao 1, Yuanyuan Zhu 1
- Litao Yu 1, Fangtao Li 1, Xingqi Zou 1
- 1National/WOAH Reference Laboratory for Classical Swine Fever, China Institute of Veterinary Drug Control, Beijing 100081, China.
- 0National/WOAH Reference Laboratory for Classical Swine Fever, China Institute of Veterinary Drug Control, Beijing 100081, China.
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Resumen
Este resumen es generado por máquina.Los investigadores desarrollaron 14 anticuerpos monoclonales (mAbs) contra la proteína CD2v del virus de la peste porcina africana (ASFV) utilizando tecnología de una sola célula B. Se estableció un nuevo ELISA de bloqueo para el diagnóstico rápido del VPA y el monitoreo epidémico.
Área De La Ciencia
- Virología
- Inmunología
- Biotecnología
Sus Antecedentes
- La peste porcina africana (PPA) es una enfermedad porcina grave causada por el virus de la PPA.
- La proteína ASFV CD2v es crucial durante la infección viral.
- La tecnología de anticuerpos de célula B única ofrece una producción eficiente de anticuerpos monoclonales (mAb).
Objetivo Del Estudio
- Preparar y caracterizar los anticuerpos monoclonales murinos (mAbs) dirigidos a la proteína ASFV CD2v.
- Desarrollar un ensayo de diagnóstico para la detección del VPA utilizando estos mAbs.
Principales Métodos
- Clonado y expresión in vitro de genes de anticuerpos.
- Preparación de 14 mAbs murinos utilizando la proteína CD2v recombinante.
- ELISA indirecto y ensayo de inmunofluorescencia (IFA) para la validación de mAb.
- Desarrollo de un ELISA de bloqueo para la detección de anticuerpos CD2v.
Principales Resultados
- Se generaron con éxito 14 mAbs contra la proteína ASFV CD2v.
- Todos los 14 mAbs mostraron reactividad con la proteína CD2v mediante ELISA indirecto.
- 8 mAbs detectaron CD2v en las células infectadas por ASFV por IFA.
- Se estableció un ELISA de bloqueo utilizando mAb C89, demostrando especificidad, sensibilidad y reproducibilidad.
Conclusiones
- Los mAbs desarrollados reconocen y se unen efectivamente al ASFV CD2v.
- El nuevo ELISA de bloqueo es una herramienta prometedora para el diagnóstico serológico rápido de la PPA.
- Este método puede contribuir a la vigilancia y el control efectivos de la peste porcina africana.
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