Generación de modificadores de epigenoma de diseño de ARNm que codifican el anti-HBV

Área de la Ciencia:

• La epigenética
• Virología
• Biología molecular

Sus antecedentes:

• La infección crónica por el virus de la hepatitis B (VHB) afecta a más de 257 millones de personas en todo el mundo, causando una mortalidad significativa por enfermedad hepática.
• Las terapias antivirales actuales tienen una capacidad limitada para eliminar el reservorio de ADN circular covalentemente cerrado (cccDNA) persistente del VHB.
• La edición del epigenoma presenta una estrategia novedosa y no mutagénica para apuntar a la expresión génica viral.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar y evaluar modificadores del epigenoma de diseño (DEM) codificados por ARNm para el silenciamiento epigenético dirigido del VHB.
• Optimizar la producción de ARNm mediante la eliminación del ARN de doble cadena inmunostimulante (ARNds).
• Evaluar la eficacia de la represión transcripcional mediada por DEM del ADN del VHB en cultivos celulares.

Principales métodos:

• Producción de DEM codificantes de ARNm diseñados para metilizar las islas de CpG en marcos de lectura abiertos clave de VHB (ORF).
• Transcripción in vitro de las secuencias DEM de la plataforma pT7 ((AG)).
• Purificación del ARNm para eliminar los contaminantes del ARNm, mejorando la expresión.
• Transfección de células cultivadas con ARNm sintetizado y evaluación de la represión transcripcional del ADN del VHB.

Principales resultados:

• Síntesis exitosa del ARNm que codifica los DEM diseñados para la modificación del epigenoma del VHB.
• Mejora de la expresión de ARNm lograda mediante protocolos de eliminación de ARNm.
• Se ha demostrado la represión transcripcional dirigida del ADN del VHB en células de cultivo mediadas por DEM.

Conclusiones:

• Los DEM suministrados por ARNm representan una estrategia viable para el silenciamiento epigenético del VHB crónico.
• Este enfoque minimiza los riesgos de integración genómica y los efectos fuera del objetivo asociados con otras tecnologías de edición de genes.
• La terapia epigenética tiene potencial para obtener beneficios terapéuticos duraderos en la infección crónica por VHB.