Exones de casete de empalme alternativo dependientes de MBNL para controlar la terapia génica en la distrofia...

Área de la Ciencia:

• La genética
• Biología molecular
• Neurología

Sus antecedentes:

• La distrofia miotónica tipo 1 (DM1) es un trastorno genético causado por la expansión repetida de CTG en DMPK.
• Las transcripciones tóxicas de DMPK secuestran proteínas similares a las de los músculos ciegos (MBNL), alterando el empalme alternativo.
• La variabilidad en la DM1 complica las estrategias terapéuticas basadas en virus.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar y probar un elemento genético que responda a la DM1 para controlar el resultado terapéutico basado en virus.
• Abordar los desafíos planteados por la variabilidad fenotípica y molecular de DM1 en la terapia génica.

Principales métodos:

• Se crearon elementos de control compatibles con el virus adeno-asociado (AAV) (DMX^on) utilizando exones de caseta dependientes de MBNL.
• Las pruebas in vitro incluyeron modelos de células MBNL1 inducibles por Dox y miotubos de células madre pluripotentes inducidas (iPSC) derivadas de DM1.
• En los estudios in vivo se utilizaron ratones modelo DM1 con inyecciones intramusculares y sistémicas de AAV.

Principales resultados:

• Las cintas de DMX demostraron una respuesta a los niveles de MBNL1 y a la expresión de ARN repetido de CUG.
• La expresión controlada de la proteína MBNL1 terapéutica a través de DMX mejoró la miotonía del músculo esquelético en ratones.
• DMX^on evitó la toxicidad cardíaca asociada con la sobreexpresión de MBNL1 en modelos de ratón DM1.

Conclusiones:

• Los elementos de control de DMX mejoran la ventana terapéutica para los tratamientos basados en virus en la DM1.
• La eficacia del DMX^on depende de la carga terapéutica y de la gravedad del modelo de enfermedad.