Purificación y caracterización de una metaloproteasa extremadamente estable a la temperatura de Geobacillus...

Área de la Ciencia:

• La bioquímica
• Enzimología
• Microbiología

Sus antecedentes:

• Las enzimas proteasas son vitales para los procesos industriales, ya que requieren estabilidad en condiciones adversas como altas temperaturas y alcalinidad.
• Los organismos termófilos son una fuente clave para descubrir enzimas robustas adecuadas para entornos extremos.

Objetivo del estudio:

• Para aislar y caracterizar una nueva proteasa termotolerante de las bacterias termofílicas que se encuentran en aguas termales.
• Evaluar el potencial de la enzima para aplicaciones biotecnológicas e industriales.

Principales métodos:

• Evaluación de 201 cepas termófilas para la producción de proteasas.
• Purificación de la proteasa objetivo mediante precipitación de sulfato de amonio, interacción hidrofóbica y cromatografía de intercambio iónico.
• Caracterización de las propiedades enzimáticas, incluida la actividad óptima, la termostabilidad, los parámetros cinéticos y la estabilidad en disolventes.

Principales resultados:

• Geobacillus thermoleovorans HBB208 fue identificado como un potente productor de proteasas.
• La proteasa purificada (HBB208pro) tiene un peso molecular de ~33,5 kDa y una actividad óptima a pH 8,0 y 70°C.
• La enzima demostró una notable estabilidad térmica, manteniendo un 50% de actividad después de 30 minutos a 87,3°C, y estabilidad en disolventes y detergentes orgánicos.

Conclusiones:

• La metaloproteasa HBB208pro exhibe una significativa termostabilidad y estabilidad en varios disolventes, lo que la convierte en un candidato prometedor para aplicaciones industriales.
• La amplia especificidad del sustrato de la enzima y su resistencia a condiciones extremas resaltan su potencial biotecnológico.