Desarrollo de un ensayo de medición de flujo lateral por recombinación rápida de la polimerasa para la detección...

Área de la Ciencia:

• Virología veterinaria
• Diagnóstico molecular
• Patología aviar

Sus antecedentes:

• El adenovirus de pato tipo 3 (DAdV-3) causa problemas de salud significativos en los patos, lo que requiere herramientas de diagnóstico rápidas.
• Es posible que los métodos de detección actuales no sean lo suficientemente rápidos para un control clínico eficaz de los brotes de DAdV-3.
• La identificación temprana es fundamental para mitigar las pérdidas económicas debidas a la morbilidad y mortalidad de los patos.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar y validar un nuevo ensayo de detección rápida para el DAdV-3.
• Evaluar la eficacia de este nuevo ensayo en un modelo clínico de infección y control de brotes.
• Establecer una herramienta de diagnóstico sensible y específica para el DAdV-3 en la práctica veterinaria.

Principales métodos:

• Desarrollo y optimización de un ensayo de amplificación de la polimerasa recombinasa (RPA) junto con una varilla de flujo lateral (LFD).
• Elaboración de un modelo clínico de infección de patos para evaluar el rendimiento del ensayo en condiciones de enfermedad.
• Validación utilizando muestras clínicas comparadas con la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa (qPCR) y evaluación de las tasas de mortalidad en patitos infectados experimentalmente.

Principales resultados:

• El ensayo RPA-LFD desarrollado proporciona resultados en 30 minutos a 42°C con alta especificidad (sin reactividad cruzada) y sensibilidad (límite de detección 1x10^1 copias/μL).
• Las pruebas en 65 muestras clínicas mostraron un acuerdo del 100% con la qPCR, dando una tasa de positividad del 33,8% y un valor de kappa de 1.
• La aplicación del ensayo RPA-LFD en un modelo de brote redujo la mortalidad de patos del 20% al 8%.

Conclusiones:

• El nuevo ensayo RPA-LFD es una herramienta altamente específica, sensible, rápida y efectiva para la detección de DAdV-3.
• Este ensayo tiene un potencial significativo para el diagnóstico oportuno y el tratamiento eficaz de las infecciones por DAdV-3 en entornos clínicos veterinarios.
• El rendimiento del ensayo en el control de un brote experimental destaca su utilidad práctica para reducir las pérdidas relacionadas con la enfermedad en las poblaciones de patos.