ADAPT-3D:procesamiento acelerado y adaptable de tejidos para imágenes tridimensionales de fluorescencia de tejidos...

Área de la Ciencia:

• Investigación biomédica
• Imágenes ópticas
• Despeje de tejidos

Sus antecedentes:

• La microscopía de lámina de luz y los métodos de limpieza de tejidos han avanzado en la investigación biomédica.
• Los protocolos de eliminación existentes a menudo implican una extensa eliminación de lípidos, que potencialmente afectan las membranas celulares y la fluorescencia.

Objetivo del estudio:

• Para presentar ADAPT-3D, un enfoque simplificado de tres pasos para la transparencia del tejido óptico.
• Permitir imágenes 3D de diversos tamaños y tipos de tejidos en todas las especies mientras se preserva la arquitectura y la fluorescencia.

Principales métodos:

• ADAPT-3D implica la eliminación parcial de lípidos y una solución acuosa no tóxica con índice de refracción.
• El protocolo está diseñado para la velocidad, el encogimiento mínimo del tejido y la preservación de la fluorescencia.
• Es aplicable a varios tipos de tejidos, incluidos cerebros de ratón enteros, preparaciones de cráneo y tejidos intestinales humanos.

Principales resultados:

• ADAPT-3D hace que los tejidos sean rápidamente transparentes mientras preserva las membranas celulares y la fluorescencia.
• Se limpiaron cerebros enteros de ratón para microscopía de hoja de luz en un paso de indexación refractiva de 4 horas después de < 4 días de preprocesamiento, sin cambio de tamaño.
• Las rebanadas cerebrales de 1 mm de espesor se eliminaron en menos de 24 horas, y la eliminación completa del cráneo del ratón se logró en 8 días.
• Los tejidos intestinales humanos fueron limpiados e inmunolabelados en aproximadamente 5 días.

Conclusiones:

• ADAPT-3D ofrece un flujo de trabajo de alta velocidad, no encogimiento y preservación de la fluorescencia para imágenes 3D.
• Este método cierra la brecha entre los estudios basados en secciones y los de órganos enteros.
• ADAPT-3D abre nuevas vías para el descubrimiento biológico en diversas áreas de investigación.