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Updated: Sep 9, 2025
12:32
EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. Part III. Virus Detection by RT-qPCR
Published on: January 16, 2016
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Prueba de amplificación isotérmica mediada por bucle de transcripción inversa colorimétrica para la detección visual,
Zhan-Hong Li1,2, Zhen-Xing Zhang1,2, Pei Zhu1,2
1Yunnan Tropical and Subtropical Animal Virus Diseases Laboratory, Yunnan Animal Science and Veterinary Institute, Kunming, 650224, China.
BMC veterinary research
|August 29, 2025
Resumen
Se desarrolló un nuevo ensayo de amplificación isotérmica mediada por bucle de transcripción inversa visual (RT-LAMP) para la detección del enterovirus porcino G (EV-G). Este método rápido y sensible ayuda a diagnosticar las infecciones por EV-G en cerdos.
Área de la Ciencia:
- Virología veterinaria
- Diagnóstico molecular
Sus antecedentes:
- El enterovirus porcino G (EV-G) es un patógeno porcino prevalente que causa pérdidas económicas significativas en la industria porcina mundial.
- Las coinfecciones con otros patógenos entéricos complican el diagnóstico de EV-G y el manejo de la enfermedad.
- Los métodos de detección existentes carecen de la sensibilidad o velocidad requeridas para el diagnóstico de campo rápido.
Objetivo del estudio:
- Desarrollar un ensayo de amplificación isotérmica con bucle de transcripción inversa (RT-LAMP) altamente sensible y detectable para EV-G.
- Establecer una herramienta de diagnóstico rápida y conveniente para la detección de EV-G en cerdos.
Principales métodos:
- Desarrollo y optimización de un ensayo colorimétrico RT-LAMP para la detección de ARN EV-G.
- Evaluación de la sensibilidad del ensayo utilizando un límite de detección definido (LOD).
- Evaluación de la especificidad frente a otros patógenos porcinos comunes.
- Validación clínica utilizando muestras fecales de cerdos en las distintas etapas de la infección.
Principales resultados:
- El ensayo RT-LAMP desarrollado permite la detección visual de EV-G en 45 minutos a 64°C.
- El ensayo logró una LOD de 46,8 copias de ARN EV-G, lo que demuestra una sensibilidad 100 veces mayor que la RT-PCR convencional.
- Se confirmó una alta especificidad, sin que se observara una amplificación cruzada con otros patógenos porcinos.
- La evaluación clínica mostró un excelente acuerdo (coeficiente de Kappa = 0,862) con la RT-PCR cuantitativa (qRT-PCR), lo que permite la detección en muestras de diferentes etapas de infección.
Conclusiones:
- Se ha establecido con éxito un método RT-LAMP visual, sensible, rápido y conveniente para la detección de EV-G.
- El ensayo es adecuado para detectar EV-G en muestras clínicas de cerdos, ofreciendo una herramienta de diagnóstico valiosa para la industria porcina.
