Inmunoensayo de enzimas de quimioluminiscencia en microplacas sensible y fiable para el ácido okadaico en mariscos

Área de la Ciencia:

• Química analítica
• Inmunología
• Ciencias de la alimentación

Sus antecedentes:

• El ácido okadaico (OA) es una toxina marina que representa un riesgo significativo para los consumidores de mariscos.
• Los métodos de detección existentes para la OA pueden carecer de sensibilidad o requerir procedimientos complejos.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar y validar un inmunoensayo analítico de enzima de quimioluminiscencia en microplacas (CLEIA) de alta sensibilidad para la detección del ácido okadaico en mariscos.
• Comparar la sensibilidad del CLEIA desarrollado con el ELISA convencional.

Principales métodos:

• Desarrollo de una formación de complejo inmunológico competitivo utilizando un anticuerpo monoclonal (McAb) contra la OA y el conjugado inmovilizado de OA-BSA en una micro placa.
• Optimización de las condiciones de ensayo, incluida la solución de recubrimiento, las concentraciones de anticuerpos, los tiempos de incubación y las reacciones de quimioluminiscencia.
• Validación del ensayo utilizando muestras de mariscos con picos y comparación con ELISA de competencia indirecta.

Principales resultados:

• El CLEIA optimizado demostró un rango de trabajo lineal de 0,0098-10 μg kg−1 con un límite de detección de 0,0098 μg kg−1.
• El CLEIA fue aproximadamente 10 veces más sensible que el ELISA, con coeficientes de variación intra e inter ensayos inferiores al 10,0%.
• Aplicación exitosa para la detección de OA en conchas marinas con altas tasas de recuperación (97,2% 111,2%) y buena correlación con los resultados del ELISA.

Conclusiones:

• El CLEIA desarrollado es un método sensible, fiable y eficiente para detectar el ácido okadaico en los mariscos.
• Este ensayo muestra un potencial significativo como herramienta de cribado preliminar para el control de la contaminación por OA en los productos del mar.
• La mayor sensibilidad y precisión de CLEIA contribuyen a mejorar la seguridad alimentaria y la protección de la salud pública.