Desarrollo de un enfoque metabolómico pseudotargeteado para la cuantificación relativa de los isómeros de doble enlace de ácidos grasos libres en el plasma de beagles

Área de la Ciencia:

• La lipidomía
• Química analítica
• La bioquímica

Sus antecedentes:

• Los ácidos grasos libres son cruciales para la energía celular y el metabolismo.
• Cuantificar las posiciones específicas de doble enlace en los AGF, en particular los isómeros de posición CC, es un desafío, pero es vital para comprender las asociaciones de enfermedades.
• Los métodos actuales de análisis de lípidos a menudo carecen de la precisión para distinguir entre los isómeros de FFA.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar y validar un método analítico sólido para la cuantificación precisa de los ácidos grasos libres en el plasma.
• Permitir el análisis a nivel de isómeros de los AGF, más allá de la cuantificación a nivel de subclases.
• Investigar cambios en los perfiles de FFA en beagles después de la administración de fármacos, lo que podría aclarar los mecanismos terapéuticos.

Principales métodos:

• Se estableció un método de derivatización en dos pasos de cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS).
• Se utilizó un modo de monitoreo de reacción múltiple (MRM) para una mayor sensibilidad y especificidad.
• Validación del método para la linealidad, la precisión y la estabilidad de acuerdo con los requisitos metabolómicos pseudotargeted.

Principales resultados:

• Se cuantificaron con éxito 30 AGF en muestras de plasma, incluidos los ácidos grasos saturados, los ácidos grasos monoinsaturados y los ácidos grasos poliinsaturados.
• Demostró la capacidad del método para analizar los cambios en el contenido de AGF antes y después de la administración de fármacos en beagles.
• El método desarrollado permite el análisis a nivel de isómeros de los AGF, ofreciendo información más profunda que los estudios a nivel de subclases.

Conclusiones:

• El método LC-MS/MS validado proporciona una herramienta poderosa para el análisis de FFA a nivel de isómeros en muestras biológicas.
• Este avance facilita una comprensión más detallada de las funciones de los AGF en los procesos metabólicos y las enfermedades.
• La aplicación del método en beagles ofrece información sobre los efectos terapéuticos de medicamentos como el sacubitril valsartan mediante el análisis de la dinámica de la FFA.