Tintes alternativos para ensayos de perfiles basados en imágenes

Área de la Ciencia:

• Imágenes y análisis celulares
• Cribado de alto contenido
• Perfiles basados en imágenes

Sus antecedentes:

• La pintura celular es un ensayo clave para el perfil basado en imágenes, utilizando seis tintes para teñir los compartimentos celulares.
• Los perfiles revelan conexiones entre las muestras y evalúan los impactos del tratamiento.
• Los investigadores pueden modificar los tintes para fenotipos específicos o imágenes de células vivas.

Objetivo del estudio:

• Evaluar nuevos tintes para el ensayo de pintura celular.
• Evaluar los tintes que reemplazan o aumentan las manchas tradicionales.
• Prueba de tintes compatibles con células vivas para imágenes dinámicas.

Principales métodos:

• Las células U2OS fueron tratadas con 90 compuestos.
• Las células fueron teñidas con tintes estándar de Cell Painting, o con MitoBrilliant o Phenovue phalloidin 400LS.
• También se probó el tinte vivo ChromaLive.

Principales resultados:

• Todos los conjuntos de tintes distinguen réplicas biológicas de controles negativos.
• Distinguir entre diferentes tratamientos compuestos fue un desafío para todos los conjuntos.
• El tinte de células vivas mostró perfiles distintos en todas las clases de compuestos, y los puntos de tiempo posteriores fueron más informativos.

Conclusiones:

• Las sustituciones de MitoBrilliant y Phenovue con falloidina 400LS tuvieron un impacto mínimo en el rendimiento de Cell Painting.
• Phenovue phalloidin 400LS ayuda a aislar las características de la actina y acomoda tintes adicionales.
• La imagen de células vivas con el tinte ChromaLive permite la evaluación en tiempo real de los cambios morfológicos, ampliando las capacidades de perfilado.