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Labeling DNA Probes03:31

Labeling DNA Probes

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DNA probes are fragments of DNA labeled with a reporter tag to enable their detection or purification. The resulting labeled DNA probes can then hybridize to target nucleic acid sequences through complementary base-pairing, and may be used to recover or identify these regions.
Radioisotopes, fluorophores, or small molecule binding partners like biotin or digoxigenin, are the most widely used reporter tags for labeling DNA probes. These labels can be attached to the probe DNA molecule via...
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  • 1Imaging Platform, Broad Institute of MIT and Harvard, Cambridge, Massachusetts, USA.

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PubMed
Resumen
Este resumen es generado por máquina.

Los nuevos tintes tienen un impacto mínimo en el rendimiento del ensayo de Cell Painting, lo que permite un perfil celular mejorado. Las imágenes de células vivas con el tinte ChromaLive rastrean los cambios morfológicos en tiempo real para un espacio de características expandido.

Palabras clave:
Pintura de célulasChroma VivoCribado de alto contenidoMito BrillanteFenovue falloidina 400LS y sus derivadosPerfiles basados en imágenesPintura con células vivasPerfiles morfológicosCribado fenotípico

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Área de la Ciencia:

  • Imágenes y análisis celulares
  • Cribado de alto contenido
  • Perfiles basados en imágenes

Sus antecedentes:

  • La pintura celular es un ensayo clave para el perfil basado en imágenes, utilizando seis tintes para teñir los compartimentos celulares.
  • Los perfiles revelan conexiones entre las muestras y evalúan los impactos del tratamiento.
  • Los investigadores pueden modificar los tintes para fenotipos específicos o imágenes de células vivas.

Objetivo del estudio:

  • Evaluar nuevos tintes para el ensayo de pintura celular.
  • Evaluar los tintes que reemplazan o aumentan las manchas tradicionales.
  • Prueba de tintes compatibles con células vivas para imágenes dinámicas.

Principales métodos:

  • Las células U2OS fueron tratadas con 90 compuestos.
  • Las células fueron teñidas con tintes estándar de Cell Painting, o con MitoBrilliant o Phenovue phalloidin 400LS.
  • También se probó el tinte vivo ChromaLive.

Principales resultados:

  • Todos los conjuntos de tintes distinguen réplicas biológicas de controles negativos.
  • Distinguir entre diferentes tratamientos compuestos fue un desafío para todos los conjuntos.
  • El tinte de células vivas mostró perfiles distintos en todas las clases de compuestos, y los puntos de tiempo posteriores fueron más informativos.

Conclusiones:

  • Las sustituciones de MitoBrilliant y Phenovue con falloidina 400LS tuvieron un impacto mínimo en el rendimiento de Cell Painting.
  • Phenovue phalloidin 400LS ayuda a aislar las características de la actina y acomoda tintes adicionales.
  • La imagen de células vivas con el tinte ChromaLive permite la evaluación en tiempo real de los cambios morfológicos, ampliando las capacidades de perfilado.