Detección visual rápida del virus iridiscente de los decápodos 1 (DIV1) mediante RPA combinado con LFS

Área de la Ciencia:

• Salud de los animales acuáticos
• Diagnóstico molecular
• Virología

Sus antecedentes:

• El virus iridiscente de los decápodos 1 (DIV1) causa pérdidas significativas en la acuicultura de camarones y cangrejos.
• El control efectivo de DIV1 requiere herramientas de diagnóstico rápidas y precisas.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un método de detección simple, rápido y visual para DIV1.
• Evaluar la sensibilidad, especificidad y fiabilidad del nuevo ensayo.

Principales métodos:

• Desarrollo y optimización de un ensayo de amplificación de la polimerasa recombinasa (RPA) dirigido a DIV1.
• Integración del RPA con la banda de flujo lateral (LFS) para la detección visual.
• Validación mediante muestras de laboratorio y de campo, comparando los resultados con la qPCR recomendada por la WOAH (OIE).

Principales resultados:

• El ensayo RPA-LFS optimizado detectó DIV1 en 18 minutos a 38°C, con resultados visibles en LFS en 3 minutos.
• El ensayo no mostró reactividad cruzada con otros patógenos comunes de los camarones.
• Se logró una alta sensibilidad, con un límite de detección inferior de 1,12 × 10¹ copias/μL.
• Los resultados del RPA-LFS fueron idénticos a los de la qPCR en 110 muestras de campo, lo que demuestra una alta fiabilidad.

Conclusiones:

• El ensayo RPA-LFS desarrollado es una herramienta valiosa para la detección rápida, visual, sensible y precisa de DIV1.
• Este método ofrece una solución práctica para la vigilancia y la gestión de enfermedades en entornos acuícolas.