Una nueva metodología híbrida LC-MS/MS para el bioanálisis cuantitativo de los conjugados anticuerpo-siRNA

Área de la Ciencia:

• Biotecnología
• Farmacología
• Química analítica

Sus antecedentes:

• Las terapias de ARN pequeño que interfiere (siRNA) son prometedoras, pero enfrentan desafíos de entrega.
• Los conjugados anticuerpo-siRNA (ARC) mejoran la entrega dirigida de las cargas útiles de siRNA.
• La cuantificación de ARC en muestras biológicas es crucial para comprender su comportamiento.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar y validar un método bioanalítico nuevo, sensible y selectivo para cuantificar los ARC.
• Establecer un ensayo basado en LC-MS/MS para los conjugados anticuerpo-siRNA en suero.
• Apoyar los estudios farmacocinéticos de los ARC en modelos preclínicos.

Principales métodos:

• Desarrollo de una metodología híbrida LC-MS/MS para la cuantificación del ARC.
• Se utilizó un anticuerpo IgG antihumano para la extracción selectiva del analito ARC del suero.
• Calificación del método en suero de ratón para Ab-siRNA01 en un rango de concentración definido.

Principales resultados:

• Se desarrolló con éxito un nuevo método híbrido LC-MS/MS y se calificó para la cuantificación ARC.
• El método demostró sensibilidad y selectividad para Ab-siRNA01 en suero de ratón (6,70-3350 ng/mL).
• El método validado se aplicó para apoyar los estudios farmacocinéticos de Ab-siRNA01 en ratones.

Conclusiones:

• Este estudio presenta el primer método híbrido LC-MS/MS para cuantificar los conjugados anticuerpo-siRNA.
• La metodología desarrollada es robusta, selectiva y adecuada para el bioanálisis ARC.
• Este enfoque facilita significativamente la investigación y el desarrollo de terapias ARC.