Purificación del antígeno O para el desarrollo de una vacuna polisacárida contra la Salmonella paratyphi

Área de la Ciencia:

• Vacunas y vacunas
• Patogénesis microbiana
• Ingeniería de Bioprocesos

Sus antecedentes:

• La fiebre entérica, causada por Salmonella Paratyphi, es un problema de salud mundial cada vez mayor debido a la creciente incidencia y resistencia a los antimicrobianos.
• Las vacunas conjugadas efectivas requieren polisacáridos de antígeno O (PS) altamente purificados conjugados con proteínas portadoras.

Objetivo del estudio:

• Optimizar una metodología de purificación y conjugación escalable para el antígeno O de Salmonella Paratyphi PS.
• Asegurar la pureza y la idoneidad del antígeno O para el desarrollo de vacunas.

Principales métodos:

• La purificación incluyó filtración por flujo tangencial (TFF) y cromatografía secuencial por intercambio catiónico/aniónico.
• Las condiciones optimizadas incluyeron la precipitación ácida (pH 3.7), la dilución antes de la cromatografía con hidroxiapatita (CHT HA Tipo-I) y una membrana TFF de 10 kDa.
• La conjugación con CRM197 utilizó una activación controlada mediada por CDAP, monitoreada por cromatografía de permeación de gel (GPC).

Principales resultados:

• Se obtiene un rendimiento de polisacáridos de 180 mg/L con una eficiencia de recuperación del 38% a escala de 80 L.
• Se ha demostrado que los niveles de impureza están por debajo de los estándares de la vacuna (< 0,6% de proteína, < 0,2% de ADN).
• Se ha confirmado la formación eficiente de conjugados de alto peso molecular y los perfiles de peso molecular reproducibles.

Conclusiones:

• La metodología optimizada proporciona un proceso robusto y escalable para la producción de antígeno O de Salmonella Paratyphi de alta pureza.
• Este proceso es adecuado para la fabricación industrial de vacunas y apoya el desarrollo de vacunas conjugadas contra la fiebre entérica.