Una transferasa de fosfopanteetileno de la especie Dictyobacter vulcani sp. W12 amplía el conjunto de herramientas...

Área de la Ciencia:

• Biocatálisis y ingeniería enzimática
• Biosíntesis de productos naturales microbianos
• Biología sintética

Sus antecedentes:

• Las poliquetases microbianas de tipo II (PKS) son ensamblajes enzimáticos cruciales para la producción de farmacóforos complejos.
• La biosíntesis combinatoria utilizando PKS de tipo II ofrece una ruta a nuevas moléculas bioactivas, pero está limitada por la compatibilidad de las proteínas.
• Las proteínas portadoras de acilo (ACP) requieren la activación por parte de las fosfopanteiniltransferasas (PPTasas) para transportar los intermediarios en las PKS.

Objetivo del estudio:

• Identificar y caracterizar una nueva PPTasa para mejorar la biosíntesis combinatoria de PKS tipo II.
• Investigar la compatibilidad del sustrato de la nueva PPTasa con varios ACP.
• Optimizar las condiciones de reacción para una activación ACP eficiente.

Principales métodos:

• Descubrimiento y expresión de una nueva PPTasa nonactinobacterial (vulcPPT) de *Dictyobacter vulcani*.
• Prueba de la actividad de vulcPPT con un grupo de ACP nativos y no nativos.
• Optimización de las condiciones de reacción de ionización del fosfopanto para mejorar la conversión de apo a holo.

Principales resultados:

• vulcPPT demostró una amplia compatibilidad con el sustrato, activando todos los ACP probados, incluido un ACP no relacionado desafiante.
• La nueva PPTasa mostró una mayor actividad en comparación con las PPTasas establecidas como AcpS y Sfp para ciertos ACP.
• Las condiciones optimizadas mejoraron la eficiencia de la activación ACP catalizada por vulcPPT.

Conclusiones:

• vulcPPT es una PPTasa versátil y eficaz para activar ACP, ampliando las posibilidades en la ingeniería de PKS de tipo II.
• Este descubrimiento facilita el acceso a componentes de síntesis funcionales para la biosíntesis combinatoria.
• Los hallazgos proporcionan una base para futuras investigaciones sobre la compatibilidad de la PPTasa y la ingeniería PKS.