Un conjunto de herramientas para el mapeo y la modulación de la neurotransmisión en vivo a resolución de una sola...

Área de la Ciencia:

• La neurociencia
• Biología molecular
• La genética

Sus antecedentes:

• La comprensión de la neurotransmisión requiere herramientas para rastrear y manipular las vesículas específicas del transmisor *in vivo*.
• Los métodos actuales carecen de la especificidad y la funcionalidad para un análisis sináptico detallado.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un conjunto de herramientas genéticas para el etiquetado fluorescente y la ablación condicional de los transportadores vesiculares en Caenorhabditis elegans.
• Mapear la coexpresión de los neurotransmisores e investigar la dinámica del tráfico de las vesículas.

Principales métodos:

• Transportadores vesiculares diseñados endógenamente para el glutamato, el GABA, la acetilcolina y las monoaminas.
• Se desarrollaron cepas knockout condicionales para la interrupción específica del empaque de neurotransmisores.
• Utilizó un enfoque guiado por la estructura basado en la topología de proteínas y la conservación evolutiva.

Principales resultados:

• Con éxito visualizado y manipulado la función del transportador mientras se mantiene la actividad fisiológica.
• Mapeado la coexpresión del transportador vesicular, identificando la co-transmisión en más del 10% de las neuronas.
• Se demostraron pools de vesículas parcialmente distintos para la serotonina y la acetilcolina en las neuronas sensoriales del ADF.

Conclusiones:

• El kit de herramientas desarrollado proporciona una poderosa plataforma para el mapeo, el monitoreo y la manipulación de la identidad y el uso de neurotransmisores "in vivo".
• Las estrategias moleculares son generalizables entre especies para diseccionar la comunicación sináptica.