JoVE - Journal of Visualized Experiments
JoVE Visualize
Contact Us
Esta página ha sido traducida por una máquina. Otras páginas pueden seguir apareciendo en inglés. View in English

El vector AAV-dCas9 desactiva el Ube3a paterno en las neuronas impidiendo la transcripción de Ube3a-ATS

  • 0UNC Neuroscience Center, The University of North Carolina at Chapel Hill, Chapel Hill, NC, USA.
Communications Biology +

|

2 de septiembre de 2025

|

2 de septiembre de 2025

Ver abstracta en PubMed

Resumen

Este resumen es generado por máquina.

Los investigadores desarrollaron una nueva terapia génica dCas9 para desactivar el gen paterno UBE3A en las neuronas del síndrome de Angelman (SA). Este enfoque ofrece potencial para el tratamiento de AS mediante la restauración de la expresión de UBE3A y la mejora de la función motora en ratones modelo.

Área De La Ciencia

  • La neurociencia
  • La genética
  • Biología molecular

Sus Antecedentes

  • El síndrome de Angelman (SA) es un trastorno grave del desarrollo neurológico.
  • La SA es el resultado de la pérdida del gen UBE3A heredado de la madre.
  • En las neuronas, el alelo paterno UBE3A es silenciado por el ARN no codificante largo Ube3a-ATS.

Objetivo Del Estudio

  • Investigar el potencial de una enzima Cas9 modificada (dNmCas9) para desactivar el alelo paterno UBE3A en la EA.
  • Para explorar un mecanismo de interferencia transcripcional para la regulación genética.
  • Evaluar la eficacia terapéutica de dNmCas9 administrado a través del virus adeno-asociado (AAV) en modelos de EA.

Principales Métodos

  • Utilizó una Neisseria meningitidis Cas9 catalíticamente inactiva (dNmCas9) dirigida a los genes Snord115 dentro del locus Ube3a-ATS.
  • Se empleó la tecnología CRISPR-Cas9 para interrumpir Ube3a-ATS e inactivar la UBE3A paterna en las células neuronales e in vivo.
  • Se administró dNmCas9 utilizando vectores AAV a ratones modelo de SA neonatales.

Principales Resultados

  • dNmCas9 desactivó con éxito el alelo paterno UBE3A latente tanto en ratones como en neuronas humanas.
  • El sistema dNmCas9 demostró una reducción dependiente de la dosis de la reexpresión de Ube3a-ATS y UBE3A.
  • El dNmCas9 liberado por AAV rescató parcialmente el fenotipo de apretamiento de extremidades traseras en ratones modelo AS.

Conclusiones

  • Las terapias basadas en dCas9, sin dominios de represión de la cromatina, pueden regular eficazmente la expresión génica a través de la interferencia transcripcional.
  • Esta estrategia es prometedora para el desarrollo de nuevos tratamientos para el síndrome de Angelman mediante la restauración de la función UBE3A.
  • Los hallazgos destacan una posible vía terapéutica para los trastornos genéticos que implican el silenciamiento de genes.