El vector AAV-dCas9 desactiva el Ube3a paterno en las neuronas impidiendo la transcripción de Ube3a-ATS

Área de la Ciencia:

• La neurociencia
• La genética
• Biología molecular

Sus antecedentes:

• El síndrome de Angelman (SA) es un trastorno grave del desarrollo neurológico.
• La SA es el resultado de la pérdida del gen UBE3A heredado de la madre.
• En las neuronas, el alelo paterno UBE3A es silenciado por el ARN no codificante largo Ube3a-ATS.

Objetivo del estudio:

• Investigar el potencial de una enzima Cas9 modificada (dNmCas9) para desactivar el alelo paterno UBE3A en la EA.
• Para explorar un mecanismo de interferencia transcripcional para la regulación genética.
• Evaluar la eficacia terapéutica de dNmCas9 administrado a través del virus adeno-asociado (AAV) en modelos de EA.

Principales métodos:

• Utilizó una Neisseria meningitidis Cas9 catalíticamente inactiva (dNmCas9) dirigida a los genes Snord115 dentro del locus Ube3a-ATS.
• Se empleó la tecnología CRISPR-Cas9 para interrumpir Ube3a-ATS e inactivar la UBE3A paterna en las células neuronales e in vivo.
• Se administró dNmCas9 utilizando vectores AAV a ratones modelo de SA neonatales.

Principales resultados:

• dNmCas9 desactivó con éxito el alelo paterno UBE3A latente tanto en ratones como en neuronas humanas.
• El sistema dNmCas9 demostró una reducción dependiente de la dosis de la reexpresión de Ube3a-ATS y UBE3A.
• El dNmCas9 liberado por AAV rescató parcialmente el fenotipo de apretamiento de extremidades traseras en ratones modelo AS.

Conclusiones:

• Las terapias basadas en dCas9, sin dominios de represión de la cromatina, pueden regular eficazmente la expresión génica a través de la interferencia transcripcional.
• Esta estrategia es prometedora para el desarrollo de nuevos tratamientos para el síndrome de Angelman mediante la restauración de la función UBE3A.
• Los hallazgos destacan una posible vía terapéutica para los trastornos genéticos que implican el silenciamiento de genes.