Diseñador Frankenproteínas que detuvieron la proliferación de las células cancerosas impulsadas por el hongo

Área de la Ciencia:

• Biología molecular
• Investigación del cáncer
• Ingeniería de proteínas

Sus antecedentes:

• El proto-oncogén MYC está sobreexpresado en más del 70% de los cánceres humanos, en particular el cáncer de mama.
• El MYC funciona asociándose con el factor de transcripción Max para unirse al elemento de respuesta de la caja E del ADN.
• Dirigirse a MYC es un objetivo importante para el desarrollo de nuevas terapias contra el cáncer.

Objetivo del estudio:

• Diseñar y caracterizar nuevas proteínas capaces de unirse específicamente al elemento de ADN de la caja E.
• Evaluar la eficacia de estas proteínas diseñadas en la regulación a la baja de los genes diana del MYC en las células de cáncer de mama.
• Evaluar el potencial terapéutico de estas proteínas para inhibir la viabilidad de las células cancerosas.

Principales métodos:

• Proteínas francas diseñadas (MEF y MEF/C93) basadas en el motivo de unión al ADN del factor de transcripción Max.
• Se utilizaron ensayos de un híbrido bacteriano y ensayos cuantitativos de desplazamiento de movilidad electroforética (EMSA) para evaluar la especificidad y la afinidad de la unión al ADN.
• Se utilizó la PCR cuantitativa para medir la regulación a la baja de los genes diana del MYC.
• Se han realizado estudios de colocalización por fluorescencia para confirmar el transporte nuclear.
• Eficacia proteica evaluada mediante ensayos de viabilidad celular (determinación del CI50).

Principales resultados:

• Las proteínas MEF y MEF/C93 demostraron una unión específica y de alta afinidad a la caja E, comparable a los factores de transcripción nativos (Kd = 8 nM).
• Estas proteínas regulaban selectivamente hacia abajo los genes objetivo de MYC en las células de cáncer de mama MDA-MB-231 dependientes de MYC, pero no en las células MCF-7 independientes de MYC.
• Las proteínas diseñadas fueron transportadas con éxito a los núcleos celulares.
• Se observaron valores de IC50 significativamente más bajos (1-2 μM) en las células MDA-MB-231 en comparación con las células MCF-7 (∼25 μM), lo que indica toxicidad selectiva.

Conclusiones:

• Las proteínas MEF y MEF/C93 diseñadas se dirigen específicamente a las células cancerosas dependientes de MYC.
• Estos hallazgos representan un avance significativo en el desarrollo de terapias basadas en proteínas para los cánceres impulsados por MYC.
• Este estudio valida un enfoque de ingeniería de proteínas para la terapia dirigida contra el cáncer.