Métricas de calidad de la medición para mejorar el recuento absoluto de células microbianas

Área de la Ciencia:

• Microbiología
• Biotecnología
• Química analítica

Sus antecedentes:

• La cuantificación precisa de las células microbianas es vital para los productos bioterapéuticos vivos, la seguridad alimentaria y los probióticos.
• Los métodos actuales como la unidad de formación de colonias (CFU), la citometría de flujo y la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) miden diferentes aspectos de las células, lo que lleva a resultados no comparables.
• La falta de un material de referencia basado en la verdad dificulta la evaluación de la exactitud de los métodos de conteo de células.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar y demostrar un análisis modificado de los métodos de conteo de células microbianas basado en la norma ISO 20391-2:2019.
• Evaluar el rendimiento y la comparabilidad de diferentes técnicas de recuento de células para muestras microbianas.
• Proporcionar un marco para la selección de métodos de conteo de células adecuados para el propósito.

Principales métodos:

• Se aplicó un análisis modificado de la norma ISO 20391-2:2019 a las muestras de células microbianas.
• Las muestras de Escherichia coli se cuantificaron utilizando la Unidad de Formación de Colonias (UFC), el principio de Coulter, la citometría de flujo de fluorescencia y la citometría de flujo de impedancia.
• Se calcularon métricas de calidad para cada método para evaluar la repetibilidad, la proporcionalidad y la variabilidad.

Principales resultados:

• Las métricas de calidad desarrolladas eran repetibles en experimentos replicados.
• Se observaron diferencias significativas en la proporcionalidad y la variabilidad entre los métodos de conteo celular probados.
• Los recuentos totales de células mostraron una buena concordancia, mientras que los recuentos de células viables mostraron una mayor variabilidad.

Conclusiones:

• El marco y las métricas de calidad introducidas ayudan a comprender el rendimiento del método para la cuantificación de células microbianas.
• La interpretación de los resultados puede orientar la selección y optimización de métodos de conteo adecuados para el propósito.
• Este enfoque apoya a los investigadores en la elección de métodos apropiados para diversas aplicaciones que requieren precisión en el recuento de células microbianas.