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Updated: May 13, 2026
08:51
Applying an Inducible Expression System to Study Interference of Bacterial Virulence Factors with Intracellular Signaling
Published on: June 25, 2015
9.4K
Construcción y optimización de un vector de expresión controlado por nisina utilizando un promotor fuerte
Yanxin Ye1, Ruiting Zhao2, Leilei Li1
1School of Life Science and Engineering, Henan University of Urban Construction, Pingdingshan, China.
Frontiers in microbiology
|September 3, 2025
Resumen
Los investigadores mejoraron el sistema de expresión génica controlada por nisina (NICE) para Streptococcus thermophilus. Mejoraron la producción de proteínas optimizando el vector de expresión inducible y el promotor, logrando la expresión más alta con un promotor P25.
Área de la Ciencia:
- Microbiología
- Biología molecular
- Biotecnología
Sus antecedentes:
- El sistema de expresión génica controlada por nisina (NICE) es eficaz para la expresión génica en Lactococcus lactis.
- Mejorar los sistemas de expresión génica en otras bacterias de ácido láctico, como Streptococcus thermophilus, es crucial para las aplicaciones biotecnológicas.
Objetivo del estudio:
- Optimizar el sistema NICE para mejorar la expresión de proteínas en Streptococcus thermophilus ATCC19258.
- Construir y evaluar un vector de expresión inducible para la producción de proteínas heterólogas.
Principales métodos:
- Construcción del vector de expresión inducible pNZ8148-PnisA-gfp-PnisR-nisR-nisK utilizando los componentes del sistema NICE.
- Electroporación del vector en Streptococcus thermophilus, Lactobacillus plantarum y Enterococcus faecium.
- Optimización de la concentración de inducción de nisina y tiempo para la máxima expresión de proteínas.
- Sustitución del promotor nativo de PnisR por promotores fuertes de Streptococcus thermophilus (P15, P18, P23, P25).
Principales resultados:
- El sistema NICE indujo con éxito la producción de proteínas en múltiples huéspedes bacterianos de ácido láctico.
- Las condiciones óptimas de inducción para Streptococcus thermophilus se determinaron como 2.500 ng/ ml de nisina durante 3 horas.
- El plásmido recombinante que utiliza el promotor P25 (pNZ8148-PnisA-gfp-P25-nisR-nisK) dio como resultado los niveles más altos de expresión de la proteína fluorescente verde (GFP).
Conclusiones:
- El sistema NICE modificado demuestra una amplia aplicabilidad en varias bacterias lácticas.
- El uso de un promotor fuerte y preseleccionado (P25) mejora significativamente la expresión de proteínas heterólogas en Streptococcus thermophilus.
- El sistema NICE mejorado basado en plásmidos tiene potencial para la producción eficiente de proteínas recombinantes en Streptococcus thermophilus.
