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Updated: Sep 9, 2025

Microbiota Analysis Using Two-step PCR and Next-generation 16S rRNA Gene Sequencing
Published on: October 15, 2019
Identificación de posibles patógenos bacterianos en las aguas residuales mediante análisis experto de fiabilidad de
Pankaj Bhatt1, Yabing Li1, John W Norton2
1Department of Civil and Environmental Engineering, Michigan State University, East Lansing, MI, USA.
La vigilancia de las aguas residuales mediante métodos de ADN y ARN identifica eficazmente los patógenos bacterianos, lo que mejora el control de la salud pública. La combinación de ARN-Kraken2 y ADN-Kraken2 ofrece una resolución taxonómica superior para las bacterias asociadas a la enfermedad.
Área de la Ciencia:
- Microbiología ambiental
- Vigilancia de la salud pública
- Diagnóstico molecular
Sus antecedentes:
- Las aguas residuales municipales sirven como una valiosa muestra compuesta por la comunidad para controlar las bacterias excretadas.
- Comprender la diversidad microbiana y los riesgos para la salud pública en las aguas residuales es crucial para la prevención de enfermedades.
Objetivo del estudio:
- Integrar el ADN (ARNr 16S de longitud completa) y los métodos de secuenciación de ARN no dirigidos con varios protocolos bioinformáticos.
- Identificar posibles patógenos bacterianos humanos en las aguas residuales y evaluar la eficacia de los diferentes enfoques de vigilancia y análisis.
Principales métodos:
- Se empleó secuenciación de genes de ARNr 16S de longitud completa y secuenciación de ARN no dirigida.
- Se utilizaron cuatro flujos de trabajo bioinformáticos: ADN-Kraken2, ADN-QIIME2, ARN-DIAMOND y ARN-Kraken2.
- Condujo una clasificación de confiabilidad de expertos para evaluar la resolución taxonómica.
Principales resultados:
- La vigilancia del ADN identificó aproximadamente el 50% de las lecturas de bacterias patógenas; la vigilancia del ARN identificó aproximadamente el 33%.
- Los flujos de trabajo bioinformáticos detectaron entre 70 y 319 especies bacterianas patógenas humanas.
- Se detectaron un total de 889 especies potencialmente patógenas en las aguas residuales de Detroit; Acinetobacter, Klebsiella, Streptococcus y Flavobacterium fueron identificados universalmente.
- La combinación de ARN-Kraken2 y ADN-Kraken2 proporcionó una mayor resolución taxonómica.
Conclusiones:
- La integración de la vigilancia del ADN y el ARN ofrece un marco sólido para la detección y el seguimiento de patógenos bacterianos en las aguas residuales.
- Este enfoque polifásico mejora la epidemiología basada en aguas residuales, contribuyendo a una mejor preparación de salud pública y seguimiento de patógenos.
- El estudio identificó géneros clave como Acinetobacter, Klebsiella, Streptococcus y Flavobacterium como patógenos potenciales significativos en las aguas residuales.
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