Método de concentración por evaporación en tubos capilares (CTEC): un nuevo enfoque de ahorro de proteínas para...

Área de la Ciencia:

• Desarrollo biofarmacéutico
• Química de las proteínas

Sus antecedentes:

• La solubilidad de anticuerpos es crítica para las evaluaciones de desarrollo de anticuerpos monoclonales (mAb) y bispecíficos (biAb).
• Los métodos existentes de medición de la solubilidad requieren cantidades significativas de proteínas y pueden inducir inestabilidad.

Objetivo del estudio:

• Introducir y validar el método de concentración por evaporación en tubos capilares (CTEC) para la medición directa de la solubilidad de anticuerpos.
• Demostrar la utilidad del CTEC en el cribado de candidatos a anticuerpos para mejorar la solubilidad.

Principales métodos:

• Desarrolló el ensayo de concentración por evaporación de tubos capilares (CTEC) para la determinación directa de la solubilidad aparente a través de la separación de la fase sólida-líquida.
• CTEC validado utilizando L-triptófano y lisozima en diferentes condiciones de pH.
• Se compararon los resultados del CTEC con los ensayos tradicionales de precipitación de polietilenglicol para los candidatos a anticuerpos.

Principales resultados:

• CTEC requiere sólo aproximadamente un mg de proteína, significativamente menos que los métodos convencionales.
• Los valores de solubilidad aparente para L-triptófano y lisozima determinados por el CTEC mostraron una buena concordancia con la literatura y las mediciones ortogonales.
• El ensayo CTEC ordenó con éxito la solubilidad de múltiples anticuerpos monoclonales y bispecíficos, correlacionándose bien con los ensayos de precipitación.

Conclusiones:

• El método CTEC ofrece un enfoque sensible y de bajo consumo de proteínas para medir la solubilidad aparente de anticuerpos.
• El CTEC es una herramienta valiosa para el cribado directo de candidatos a anticuerpos con perfiles de solubilidad mejorados durante las evaluaciones de desarrollo.