Cas9 altamente estable promueve la destrucción del genoma del VHB antagonizando la degradación mediada por HSC70

Área de la Ciencia:

• Biología molecular
• Virología
• Biología celular

Sus antecedentes:

• CRISPR/Cas9 es un sistema inmune procariótico utilizado contra las infecciones virales.
• La mejora de la eficacia de CRISPR/Cas9 en la eliminación de infecciones virales persistentes como el VHB es crucial.

Objetivo del estudio:

• Para aclarar la vía de degradación de la proteína Cas9 en las células humanas.
• Desarrollar una variante más estable de Cas9 para una terapia antiviral mejorada.

Principales métodos:

• Se ha investigado la degradación de la proteína Cas9 mediante autofagia mediada por chaperonas (CMA) y vías lisosómicas.
• Se identificó a la proteína 70 (HSC70) como un mediador clave en la degradación de Cas9.
• Diseñado un mutante altamente estable de Cas9 (HSCas9) mediante la modificación de motivos similares a KFERQ.

Principales resultados:

• La proteína Cas9 se degrada principalmente a través de la vía CMA- lisosoma mediada por HSC70.
• HSCas9 mostró una mayor estabilidad al resistir la degradación mediada por HSC70.
• HSCas9 mejoró la capacidad del sistema CRISPR/ Cas9 para eliminar la infección por el virus de la hepatitis B (VHB) sin citotoxicidad ni efectos fuera del objetivo.

Conclusiones:

• Descubrió el mecanismo molecular de la degradación de la proteína Cas9 en células humanas.
• Se desarrolló una variante estabilizada de Cas9 (HSCas9) con mejores capacidades antivirales contra el VHB.
• Proporcionó una nueva estrategia para mejorar las terapias basadas en CRISPR / Cas9 para las infecciones virales.