Un nuevo ensayo de amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP) para la detección de salmonela. Tifimurio en los...

Área de la Ciencia:

• Microbiología de los alimentos
• Diagnóstico molecular
• Salud pública

Sus antecedentes:

• Salmonella enterica subsp. y sus subespecies enterica serovar Typhimurium es una de las principales causas de enfermedades transmitidas por los alimentos en todo el mundo.
• Detección precisa de la presencia de salmonela. El tifimurio es fundamental para garantizar la inocuidad de los alimentos y proteger la salud pública.
• Los métodos de detección existentes pueden carecer de la rapidez, la sensibilidad o la simplicidad requeridas para la supervisión rutinaria de la inocuidad de los alimentos.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un ensayo de amplificación isotérmica (LAMP) rápido y sensible para la detección de Salmonella. Detección de tifimurio.
• Para validar el rendimiento del ensayo en la identificación de la Salmonella ser. Tifimurio en los productos de huevo.
• Para comparar el ensayo LAMP desarrollado con métodos establecidos como la PCR en tiempo real y el cultivo de BAM de la FDA.

Principales métodos:

• Un juego de iniciación específico dirigido al marco de lectura abierto STM3845 de Salmonella ser. Typhimurium fue diseñado.
• Las condiciones del ensayo LAMP (reagentes, temperatura, tiempo) se optimizaron para obtener la máxima amplificación y fluorescencia.
• La especificidad del ensayo se probó contra varios serotipos de Salmonella y bacterias no Salmonella; su sensibilidad y rendimiento en productos de huevo se compararon con la PCR en tiempo real y el cultivo de BAM de la FDA.

Principales resultados:

• El ensayo LAMP optimizado detectó Salmonella ser. Typhimurium específicamente, con reactividad cruzada observada sólo para los serotipos de Salmonella Montevideo, Michigan y Senftenberg.
• El ensayo demostró un límite de detección de 0,56 log CFU/ml en cultivo puro, mostrando una sensibilidad 100 veces mayor que la PCR en tiempo real.
• En el ensayo de muestras de huevos y productos de huevo, el rendimiento del ensayo LAMP fue comparable al método de cultivo BAM de la FDA.

Conclusiones:

• El ensayo LAMP desarrollado proporciona un método rápido, específico y altamente sensible para la detección de Salmonella ser. Tifimurio en los productos de huevo.
• Este ensayo es una herramienta valiosa para el seguimiento rutinario de la inocuidad de los alimentos, las investigaciones de brotes y las pruebas in situ debido a su simplicidad y rapidez.
• El ensayo LAMP ofrece una alternativa prometedora a los métodos convencionales para mejorar la vigilancia de la inocuidad de los alimentos.