Determinación de las concentraciones inhibidoras mínimas y de la susceptibilidad a los antibióticos para...

Área de la Ciencia:

• Microbiología y enfermedades infecciosas
• Biotecnología e ingeniería biomédica
• Diagnóstico clínico

Sus antecedentes:

• El tratamiento antibiótico temprano es crucial para reducir la mortalidad de los pacientes, pero a menudo se retrasa con los métodos convencionales de prueba de susceptibilidad antimicrobiana (AST).
• La TEA actual requiere de 16 a 24 horas de incubación, lo que dificulta las decisiones clínicas oportunas.
• La citometría de flujo (FCM) ofrece un análisis rápido de una sola célula de las propiedades celulares, incluida la fluorescencia.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar y evaluar un ensayo basado en la citometría de flujo (FCM) para la determinación rápida de las concentraciones mínimas inhibidoras de antibióticos (MIC).
• Evaluar la viabilidad del uso de mediciones de especies reactivas de oxígeno (ROS) mediante FCM como alternativa a las AST convencionales.
• Determinar la precisión de las mediciones de ROS basadas en FCM para varios antibióticos contra Enterobacterales resistentes a los carbapenemas.

Principales métodos:

• Se generaron especies reactivas de oxígeno (ROS) en bacterias tratadas con antibióticos y se midió la fluorescencia mediante citometría de flujo (FCM).
• Se han determinado los CIM para la amikacina, el aztreonam, las cefalosporinas, los carbapenemas, la levofloxacina, la polimixina B, el trimetoprima/sulfametoxazol y la tigeciclina.
• Se compararon los MIC derivados de la FCM con los AST convencionales de dilución en microbrotas para seis aislados de Enterobacterales resistentes a los carbapenes clínicos.

Principales resultados:

• Las mediciones de ROS basadas en FCM demostraron una alta precisión (91,7%) para la determinación de los MIC de carbapenem.
• También se observó una determinación precisa de la CMI para trimetoprim/ sulfametoxazol (83,3%).
• Se observó una menor precisión para la amikacina, el aztreonam, las cefalosporinas, la polimixina B, la levofloxacina y la tigeciclina, lo que indica una variabilidad por clase de antibiótico.

Conclusiones:

• La evaluación de la citometría de flujo de ROS es un método viable para determinar con precisión los MIC de carbapenem en Enterobacterales.
• Este ensayo FCM ofrece una alternativa significativamente más rápida a la AST convencional para combinaciones específicas de antibióticos y bacterias.
• Es necesaria una mayor optimización y validación para una aplicación más amplia en diversas cepas bacterianas y tipos de antibióticos.