HSP-1-Nanocuerpos Específicos Alteran la Función del Chaperón en vitro y en vivo

Área de la Ciencia:

• Biología molecular
• Biología celular
• Investigación sobre el envejecimiento

Sus antecedentes:

• Las chaperonas de la proteína de choque térmico 70 (HSP70) son cruciales para mantener la proteostasis celular.
• La proteostasis disfuncional y la agregación de proteínas están implicadas en el envejecimiento y las enfermedades neurodegenerativas.
• La orientación de la actividad HSP70 presenta una estrategia terapéutica potencial, pero faltan herramientas selectivas.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar nuevos nanobodies para la modulación específica de la actividad de la chaperona HSP70.
• Para investigar la eficacia de estos nanobodies contra el * Caenorhabditis elegans * ortholog, HSP-1.
• Evaluar los efectos *in vitro* e *in vivo* de la unión de nanobodies en la función de HSP-1 y la resistencia al estrés celular.

Principales métodos:

• Generación y caracterización de dos nanobodies (B12 y H5) dirigidos al HSP-1 recombinante y endógeno.
• Ensayos in vitro para medir la actividad de la ATPasa HSP-1 y la inhibición de la capacidad de plegamiento de las proteínas.
• Generación de C. elegans transgénica que exprese B12 o H5 para estudios de resistencia al estrés in vivo.
• Comparación de los efectos de los nanobodies con el bloqueo de *hsp-1* mediado por la interferencia de ARN.

Principales resultados:

• Los nanobodies B12 y H5 se unen específicamente a HSP-1, con diferencias atribuidas a dos aminoácidos en sus regiones determinantes de complementariedad.
• Ambos nanobodies dependiendo de la dosis redujeron la actividad de la ATPasa HSP-1 y la capacidad de plegamiento de proteínas in vitro.
• La expresión in vivo de B12, pero no H5, en *C. elegans* disminuyó la supervivencia bajo el calor y el estrés proteotóxico, imitando *hsp-1* knockdown.

Conclusiones:

• Los nuevos nanobodies B12 y H5 son inhibidores efectivos y específicos de la actividad de la chaperona HSP-1.
• Estos nanobodies sirven como herramientas valiosas para estudiar la función de HSP-1 in vivo.
• Los hallazgos sientan las bases para el desarrollo de nanobodies dirigidos a HSP70 como terapias para el envejecimiento y los trastornos de plegamiento de proteínas.