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Pruebas de estabilidad de HPC y MNC a partir de productos de aféresis
- Jinxia Ma 1, Lipei Shao 1, Tatyana Fuksenko 1, Hui Liu 1, Chunjie Jiang 1, Yihua Cai 1, Yong Soo Kim 1, Kathryn Martin 1, Larry Moses 1, Nan Zhang 1, Anh Dinh 1, Robert P Somerville 1, David F Stroncek 1, Ping Jin 1
- Jinxia Ma 1, Lipei Shao 1, Tatyana Fuksenko 1
- 1Center for Cellular Engineering, Department of Transfusion Medicine and Center for Cellular Engineering, NIH Clinical Center, Bethesda, MD 20892, USA.
- 0Center for Cellular Engineering, Department of Transfusion Medicine and Center for Cellular Engineering, NIH Clinical Center, Bethesda, MD 20892, USA.
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Resumen
Este resumen es generado por máquina.Las muestras de células progenitoras hematopoyéticas (HPC) y de células mononucleares (MNC) son estables durante 3 días a 4°C para el recuento de glóbulos blancos y la citometría de flujo. Sin embargo, los HPC muestran cambios transcriptómicos tempranos, lo que requiere un análisis molecular rápido.
Área De La Ciencia
- Biología celular y molecular
- Hematología
- Biotecnología
Sus Antecedentes
- Las células progenitoras hematopoyéticas (HPC) y las células mononucleares (MNC) son vitales para las terapias celulares como el trasplante de médula ósea.
- La evaluación de las características del producto durante la recolección, el almacenamiento y el transporte es crucial para mantener la viabilidad y la función celular.
Objetivo Del Estudio
- Evaluar la estabilidad funcional y molecular de muestras frescas de HPC y MNC almacenadas a 4°C durante un máximo de 4 días.
- Determinar el impacto de la duración del almacenamiento en la viabilidad celular, los marcadores fenotípicos y los perfiles transcriptómicos.
Principales Métodos
- Las muestras de HPC (n=7) y MNC (n=6) se almacenaron a 4°C y se analizaron en los días 0-4.
- Las evaluaciones incluyeron recuentos de glóbulos blancos (WBC), citometría de flujo (usando marcadores específicos de la superficie celular) y secuenciación de ARN a granel (RNA-seq).
- La viabilidad celular se evaluó mediante la tinción con 7-AAD.
Principales Resultados
- Los recuentos de glóbulos blancos y los marcadores de citometría de flujo se mantuvieron relativamente estables durante un máximo de 4 días, con una mayor variabilidad en los HPC.
- La viabilidad celular disminuyó significativamente con el tiempo, mostrando variabilidad entre productos.
- Las muestras de MNC mantuvieron perfiles de expresión génica estables, mientras que las muestras de HPC mostraron cambios transcriptómicos significativos al día 1 del almacenamiento.
Conclusiones
- Los recuentos de glóbulos blancos y los marcadores de citometría de flujo son estables durante hasta 3 días a 4°C, lo que apoya el análisis fenotípico retrasado.
- Las alteraciones transcriptómicas significativas en los HPC requieren una evaluación molecular inmediata para preservar la integridad.
- Los resultados ponen de relieve la necesidad de ensayos moleculares rápidos para aplicaciones basadas en HPC a pesar de los marcadores fenotípicos estables.
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