Pruebas de estabilidad de HPC y MNC a partir de productos de aféresis

Área de la Ciencia:

• Biología celular y molecular
• Hematología
• Biotecnología

Sus antecedentes:

• Las células progenitoras hematopoyéticas (HPC) y las células mononucleares (MNC) son vitales para las terapias celulares como el trasplante de médula ósea.
• La evaluación de las características del producto durante la recolección, el almacenamiento y el transporte es crucial para mantener la viabilidad y la función celular.

Objetivo del estudio:

• Evaluar la estabilidad funcional y molecular de muestras frescas de HPC y MNC almacenadas a 4°C durante un máximo de 4 días.
• Determinar el impacto de la duración del almacenamiento en la viabilidad celular, los marcadores fenotípicos y los perfiles transcriptómicos.

Principales métodos:

• Las muestras de HPC (n=7) y MNC (n=6) se almacenaron a 4°C y se analizaron en los días 0-4.
• Las evaluaciones incluyeron recuentos de glóbulos blancos (WBC), citometría de flujo (usando marcadores específicos de la superficie celular) y secuenciación de ARN a granel (RNA-seq).
• La viabilidad celular se evaluó mediante la tinción con 7-AAD.

Principales resultados:

• Los recuentos de glóbulos blancos y los marcadores de citometría de flujo se mantuvieron relativamente estables durante un máximo de 4 días, con una mayor variabilidad en los HPC.
• La viabilidad celular disminuyó significativamente con el tiempo, mostrando variabilidad entre productos.
• Las muestras de MNC mantuvieron perfiles de expresión génica estables, mientras que las muestras de HPC mostraron cambios transcriptómicos significativos al día 1 del almacenamiento.

Conclusiones:

• Los recuentos de glóbulos blancos y los marcadores de citometría de flujo son estables durante hasta 3 días a 4°C, lo que apoya el análisis fenotípico retrasado.
• Las alteraciones transcriptómicas significativas en los HPC requieren una evaluación molecular inmediata para preservar la integridad.
• Los resultados ponen de relieve la necesidad de ensayos moleculares rápidos para aplicaciones basadas en HPC a pesar de los marcadores fenotípicos estables.