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HT SpaceM: un método de alto rendimiento y reproducible para la metabolomía de moléculas pequeñas de una sola célula
- 1Molecular Systems Biology Unit, European Molecular Biology Laboratory, Heidelberg, Baden-Württemberg 69117, Germany; Department of Pharmacology, University of California, San Diego, La Jolla, CA 92093, USA.
- 2Molecular Systems Biology Unit, European Molecular Biology Laboratory, Heidelberg, Baden-Württemberg 69117, Germany.
- 3Metabolomics Core Facility, European Molecular Biology Laboratory, Heidelberg, Baden-Württemberg 69117, Germany.
- 4Molecular Systems Biology Unit, European Molecular Biology Laboratory, Heidelberg, Baden-Württemberg 69117, Germany; Department of Pharmacology, University of California, San Diego, La Jolla, CA 92093, USA; Collaboration for Joint PhD Degree Between EMBL and Heidelberg University, Faculty of Biosciences, Heidelberg, Baden-Württemberg 69047, Germany.
- 5Molecular Systems Biology Unit, European Molecular Biology Laboratory, Heidelberg, Baden-Württemberg 69117, Germany; Department of Pharmacology, University of California, San Diego, La Jolla, CA 92093, USA; Metabolomics Core Facility, European Molecular Biology Laboratory, Heidelberg, Baden-Württemberg 69117, Germany; Department of Bioengineering, University of California, San Diego, La Jolla, CA 92093, USA; Molecular Medicine Partnership Unit, Heidelberg, Baden-Württemberg 69117, Germany; DeepCyte Inc., San Diego, CA 92122, USA.
- 0Molecular Systems Biology Unit, European Molecular Biology Laboratory, Heidelberg, Baden-Württemberg 69117, Germany; Department of Pharmacology, University of California, San Diego, La Jolla, CA 92093, USA.
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Resumen
Este resumen es generado por máquina.La metabolomía unicelular de alto rendimiento (HT SpaceM) permite un análisis robusto de más de 140.000 células, revelando la heterogeneidad metabólica y los marcadores específicos de tipo celular para la investigación del cáncer.
Área De La Ciencia
- Metabolomía
- Espectrometría de masas
- Biología del cáncer
Sus Antecedentes
- Los métodos actuales de metabolomía unicelular (SCM) se enfrentan a desafíos en la detección, el rendimiento y la reproducibilidad de los metabolitos.
- Comprender el metabolismo celular a nivel de una sola célula es crucial para diseccionar la complejidad y la heterogeneidad biológica.
Objetivo Del Estudio
- Desarrollar un método SCM reproducible de alto rendimiento para un perfil metabólico completo.
- Establecer un marco unificado para el análisis de los datos de gestión de la calidad, incluido el control de calidad y la interpretación funcional.
- Investigar la heterogeneidad metabólica e identificar marcadores metabólicos en las líneas celulares del cáncer.
Principales Métodos
- Desarrolló HT SpaceM, que integra la preparación de células, la ionización por desorción láser asistida por matriz (MALDI) y la espectrometría de masas de imágenes (MS) y el procesamiento de lotes.
- Detección de metabolitos validados mediante cromatografía líquida a granel en tándem (LC-MS/MS).
- Aplicó el marco para perfilar más de 140.000 células de varias líneas celulares de cáncer y muestras de control.
Principales Resultados
- Se detectaron 73 metabolitos de moléculas pequeñas con alta reproducibilidad y resolución de una sola célula.
- Se identificaron marcadores metabólicos y centros metabólicos específicos del tipo de célula en nueve líneas celulares de cáncer NCI-60.
- Se observaron cambios metabólicos coordinados y heterogeneidad intracondicional tras la inhibición de la glucólisis en las células HeLa.
Conclusiones
- HT SpaceM proporciona una solución robusta y escalable para la metabolomía unicelular a gran escala.
- El método facilita el descubrimiento de conocimientos metabólicos más allá de los promedios de la población, cruciales para comprender los mecanismos de la enfermedad.
- Este trabajo ofrece un marco para el avance de la investigación de SCM y su aplicación en estudios biomédicos.
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