Protocolo para el aislamiento optimizado de células mononucleares de tejido hepático y tumoral mediante digestión...

Área de la Ciencia:

• * Cirugía hepatobiliar; * Inmunología; * Investigación del cáncer

Sus antecedentes:

• * La comprensión del microambiente tumoral (TME) en el carcinoma hepatocelular (CHC) es crucial para el desarrollo de terapias contra el cáncer eficaces.; * Las células mononucleares dentro del tejido hepático, que abarcan regiones tumorales y no tumorales, son componentes clave del TME.; * El aislamiento de estas células es esencial para estudios inmunológicos detallados.

Objetivo del estudio:

• * Presentar un protocolo detallado para la disociación de tejido hepático humano de pacientes con CHC.; * Esbozar métodos para generar una suspensión de células únicas adecuada para análisis posteriores.; * Describir el aislamiento de células mononucleares y la posterior caracterización de células inmunitarias mediante citometría de flujo.

Principales métodos:

• * Disociación del tejido mediante métodos de digestión mecánica o enzimática.; * Separación de células mononucleares mediante centrifugación con gradiente de densidad.; * Tinción por citometría de flujo para la identificación y fenotipificación de células inmunitarias.

Principales resultados:

• * Generación exitosa de suspensiones de células únicas a partir de tejido hepático de CHC.; * Aislamiento eficiente de células mononucleares tanto de regiones tumorales como no tumorales del hígado.; * Factibilidad demostrada de la tinción por citometría de flujo para el análisis de poblaciones de células inmunitarias.

Conclusiones:

• * El protocolo presentado proporciona un método fiable para el aislamiento de células mononucleares de tejido hepático de CHC.; * Esta técnica facilita el estudio integral de los infiltrados de células inmunitarias dentro del microambiente tumoral del CHC.; * Las células aisladas son adecuadas para análisis inmunológicos avanzados, lo que ayuda al desarrollo de terapias dirigidas.