Terapia de células CAR-T basada en ARNm circular sin cicatrices que induce una eficacia antitumoral superior

Área de la Ciencia:

• Biotecnología
• Inmunoterapia
• Biología Molecular

Sus antecedentes:

• La expresión transitoria de receptores de antígenos quiméricos (CAR) basada en ARNm ofrece ventajas de seguridad sobre los vectores virales para las terapias de células CAR-T.
• Los ARNm lineales convencionales presentan inestabilidad, lo que limita la duración de la expresión de proteínas y la eficacia terapéutica.
• Persisten desafíos en la optimización de la estabilidad del ARNm y la expresión de proteínas para inmunoterapias celulares avanzadas.

Objetivo del estudio:

• Diseñar una plataforma novedosa para la síntesis de ARNm circulares (ARNm circulares) estables y sin cicatrices para mejorar la expresión de CAR.
• Comparar la magnitud y durabilidad de la expresión de ARNm circulares frente a ARNm lineales en células CAR-T.
• Evaluar la eficacia antitumoral funcional de las células CAR-T basadas en ARNm circular in vitro e in vivo.

Principales métodos:

• Desarrollo de una plataforma de exón intrón permutado (PIE) de alta eficiencia para la síntesis de ARNm circulares sin cicatrices.
• Transfección de células T humanas primarias con ARNm circulares modificados que codifican CAR anti-CD19 y anti-GPRC5D.
• Evaluación de los niveles de expresión de CAR, duración, activación de células T y marcadores de agotamiento.
• Evaluación de la citotoxicidad in vitro, liberación de citoquinas y modelos de tumores in vivo.

Principales resultados:

• Los ARNm circulares demostraron una magnitud y duración de la expresión de CAR significativamente mayores en comparación con los ARNm lineales.
• Las células CAR-T basadas en ARNm circular exhibieron una citotoxicidad específica de antígeno y una liberación de citoquinas superiores in vitro.
• El análisis transcriptómico reveló una activación sostenida de las células T y la ausencia de firmas de agotamiento en las células tratadas con ARNm circular.
• Los estudios in vivo mostraron una mejora en la eliminación tumoral y beneficios de supervivencia prolongados con células CAR-T basadas en ARNm circular.

Conclusiones:

• El ARN mensajero circular (ARNm circular) sin cicatrices representa una modalidad de próxima generación para una expresión de CAR potente y duradera.
• La plataforma de ARNm circular agiliza la fabricabilidad y potencialmente reduce la detección inmune innata.
• La tecnología de ARNm circular tiene una gran promesa para avanzar en la inmunoterapia celular y la medicina de precisión.