Identificación de moléculas pequeñas mediante HTRF que se dirigen a la interacción de la proteína E del SARS-CoV-2...

Área de la Ciencia:

• Virología; Biología Estructural; Descubrimiento de Fármacos

Sus antecedentes:

• La proteína E del SARS-CoV-2 interactúa con proteínas del huésped como ZO-1, lo que ayuda a la patogénesis viral. Dirigirse a la interacción del motivo de unión a PDZ (PBM) de la proteína E es una estrategia terapéutica potencial.

Objetivo del estudio:

• Elucidar la base estructural de la interacción entre el PBM de la proteína E y el PDZ2 de ZO-1. Identificar moléculas pequeñas que inhiban esta interacción para el desarrollo antiviral.

Principales métodos:

• Cristalografía de rayos X para determinar la estructura del complejo. Cribado de HTRF de una biblioteca de compuestos. Ensayos de citotoxicidad, estudios de dosis-respuesta, simulaciones de acoplamiento y ensayos antivirales.

Principales resultados:

• La estructura de rayos X reveló un dímero de ZO-1 PDZ2 intercambiado de dominio unido por el péptido E PBM. El cribado HTRF identificó 36 compuestos que inhiben la interacción, y 14 mostraron promesa después de ensayos adicionales. Los compuestos inhibieron la interacción a través de la unión competitiva o al prevenir la dimerización de ZO-1. Un compuesto, C19, redujo significativamente la replicación del SARS-CoV-2 en ensayos antivirales.

Conclusiones:

• La interacción proteína E del SARS-CoV-2/ZO-1 PDZ2 puede ser inhibida por moléculas pequeñas a través de mecanismos directos o indirectos. El compuesto C19 demuestra potencial como candidato terapéutico antiviral dirigido a esta interacción.