Estrategia refinada de prueba de ADA para superar la interferencia de sRANKL en la evaluación de la inmunogenicidad...

Área de la Ciencia:

• Desarrollo biofarmacéutico
• Evaluación de la inmunogenicidad
• Biosimilares de anticuerpos monoclonales

Sus antecedentes:

• FKS518, un biosimilar de denosumab, se dirige al ligando de factor nuclear kappa-B activador del receptor (RANKL).
• Los niveles elevados de RANKL soluble (sRANKL) después de la dosis pueden interferir con los ensayos de anticuerpos contra el fármaco (ADA).
• La disociación ácida exacerba la interferencia de sRANKL en los ensayos de puente de ADA.

Objetivo del estudio:

• Evaluar la interferencia de sRANKL en ensayos de puente de ADA para FKS518.
• Desarrollar un método para diferenciar las respuestas verdaderas de ADA de los artefactos de interferencia de sRANKL.
• Asegurar la evaluación precisa de la inmunogenicidad del biosimilar de denosumab.

Principales métodos:

• Se introdujo un nivel de especificidad que utiliza osteoprotegerina (OPG) para bloquear competitivamente el sRANKL.
• Se reanalizaron muestras previamente positivas para ADA utilizando el ensayo modificado.
• Se evaluó el impacto de OPG en la dilución mínima requerida (MRD) del ensayo y las señales de control.

Principales resultados:

• La disociación ácida provocó altas tasas de falsos positivos de ADA (aproximadamente 96-98%) en estudios clínicos.
• El nivel de especificidad con OPG redujo la positividad observada de ADA a ≤3.9%.
• La adición de OPG mantuvo la integridad del ensayo sin afectar el rendimiento de MRD o control.

Conclusiones:

• La evaluación temprana y la mitigación de la interferencia relacionada con el objetivo son cruciales para las pruebas de inmunogenicidad de biosimilares.
• Una estrategia de ensayo multinivel que incluye un nivel de especificidad aborda de manera robusta la interferencia de sRANKL.
• Este enfoque garantiza pruebas confiables de ADA para programas de biosimilares que enfrentan desafíos similares.