Retargeting conmutado de vectores lentivirales a través de una molécula adaptadora que se une a VSV-G

Área de la Ciencia:

• Terapia Génica
• Biología Molecular
• Biotecnología

Sus antecedentes:

• La entrega génica selectiva es crucial para la terapia génica con vectores lentivirales (LV).
• La pseudotipificación con la glicoproteína del virus de la estomatitis vesicular (VSV-G) mejora la infectividad del LV pero carece de especificidad celular debido a la expresión ubicua del receptor de lipoproteínas de baja densidad (LDLR).
• La orientación a poblaciones celulares específicas requiere superar el tropismo amplio de los LV pseudotipados con VSV-G.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un sistema de orientación modular y específico del receptor para LV pseudotipados con VSV-G.
• Crear un adaptador bispecífico que mantenga la eficiencia de producción y permita la entrega génica dirigida.
• Evaluar la eficacia del adaptador 929-B6 para redirigir LV a células que expresan ERBB2.

Principales métodos:

• Se diseñó un adaptador bispecífico (929-B6) que combina un nanocuerpo que se une a VSV-G y un DARPin que se une a ERBB2.
• Se generaron y cribaron nanobodies anti-VSV-G a partir de una biblioteca inmune de alpacas.
• Se evaluaron los LV redirigidos por 929-B6 (VSV-G de tipo salvaje y ablatado para el receptor) en líneas celulares con ERBB2 positivo y negativo y en un modelo de xenoinjerto en ratones.

Principales resultados:

• El adaptador 929-B6 permitió la transducción eficiente y específica de células que expresan ERBB2.
• La preincubación con 929-B6 aumentó la transducción de LV hasta ocho veces en células ERBB2+.
• La mejora de la transducción se correlacionó con la densidad de superficie de ERBB2 en líneas celulares de cáncer de mama.
• La imagen in vivo mostró señales localizadas en tumores en tumores ERBB2+ tratados con LV modificados con 929-B6.

Conclusiones:

• El adaptador 929-B6 ofrece un método rápido y escalable para redirigir los stocks de LV estándar a receptores específicos.
• Este enfoque evita la reingeniería de la envoltura viral o la co-empaquetamiento de plásmidos.
• La modularidad de 929-B6 presenta una plataforma versátil para la terapia génica y aplicaciones oncolíticas que requieren un tropismo definido.