La 2,8-dihidroxiadenina altera la integridad epitelial y el fenotipo de las células renales in vitro

Área de la Ciencia:

• Nefrología; Biología Celular; Bioquímica

Sus antecedentes:

• La deficiencia de Adenina fosforribosiltransferasa (APRT) conduce a la acumulación de 2,8-dihidroxiadenina (DHA), causando cálculos renales y enfermedad renal crónica (ERC).
• Los tratamientos actuales como los inhibidores de la xantina oxidorreductasa no son tolerados por todos los pacientes, lo que requiere estrategias terapéuticas alternativas.
• La comprensión del impacto celular de DHA es crucial para desarrollar nuevos tratamientos para la nefropatía por cristales de DHA.

Objetivo del estudio:

• Investigar los efectos estructurales y moleculares de DHA en líneas celulares renales (HK-2, HEK293, MDCK).
• Identificar posibles dianas celulares para la intervención terapéutica en la enfermedad renal relacionada con DHA.

Principales métodos:

• Exposición de células HK-2, HEK293 y MDCK a diferentes concentraciones de DHA.
• Evaluación de la viabilidad celular, migración e integridad epitelial (utilizando Resistencia Eléctrica Transepitelial - TEER).
• Análisis de los cambios en la expresión génica mediante secuenciación de ARN e identificación de proteínas de adhesión mediante inmunofluorescencia.

Principales resultados:

• La exposición a DHA redujo la viabilidad y migración de las células renales de manera dependiente de la dosis.
• DHA alteró la integridad epitelial en células MDCK, indicado por la disminución de los valores de TEER.
• Se observó un aumento en la expresión de la proteína de adhesión CD44 cerca de los cristales de DHA en células HEK293 y HK-2.
• La secuenciación de ARN reveló que DHA sobreexpresó las vías de señalización de TNF-α y mTORC1, mientras que infraexpresó la transición epitelio-mesénquima (EMT) y la fosforilación oxidativa.

Conclusiones:

• DHA exhibe toxicidad dependiente de la dosis, alterando la función y la integridad de las células renales.
• CD44 puede desempeñar un papel en la adhesión de los cristales de DHA, presentando una posible diana terapéutica.
• DHA altera significativamente las vías celulares involucradas en la inflamación, el metabolismo y la regulación del ciclo celular, contribuyendo al daño renal.