Aptámeros Bispecíficos Mediados por Nanoestructuras de ADN para Reconocimiento Multiepitópico y Neutralización Viral...

Área de la Ciencia:

• Biología molecular
• Virología
• Biotecnología

Sus antecedentes:

• Las mutaciones virales pueden mejorar la infectividad y conducir al escape terapéutico.
• La neutralización de proteínas virales clave a pesar de la variación de la secuencia es crucial para estrategias antivirales efectivas.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un aptámero neutralizante bispecífico (Aptx2-L) dirigido a dos epítopos distintos en el dominio de unión al receptor (RBD) de SARS-CoV-2.
• Evaluar la robustez del reconocimiento de epítopos duales contra mutaciones virales y su impacto en la afinidad de unión y la eficacia de neutralización.
• Establecer una plataforma generalizable para dirigirse a proteínas mutables mediante estrategias de participación multisitio.

Principales métodos:

• Diseño y síntesis de un aptámero bispecífico (Aptx2-L) diseñado para unirse a dos epítopos en el RBD de SARS-CoV-2.
• Utilización de un marco de ADN para controlar el espaciado y la orientación del aptámero para una unión óptima.
• Evaluación de la afinidad de unión de Aptx2-L al RBD utilizando análisis termodinámico.
• Evaluación de la actividad inhibidora de Aptx2-L contra la infección por pseudovirus de SARS-CoV-2 salvaje y mutante en cultivos celulares.

Principales resultados:

• Aptx2-L demostró una afinidad de unión nanomolar al RBD a través de una unión sinérgica en dos sitios distintos.
• La estrategia de epítopo dual confirió robustez contra mutaciones de un solo punto, reduciendo el riesgo de escape viral.
• Aptx2-L inhibió potentemente la infección por pseudovirus de SARS-CoV-2 tanto salvaje como mutante, superando a los cócteles de aptámeros monospécificos.
• El marco de ADN permitió una presentación geométrica precisa, maximizando la eficiencia de unión.

Conclusiones:

• Los aptámeros bispecíficos que se unen a múltiples epítopos ofrecen una estrategia robusta para neutralizar virus mutables como el SARS-CoV-2.
• La plataforma Aptx2-L proporciona una afinidad de unión mejorada y una potente actividad antiviral, superando las limitaciones de los enfoques monospécificos.
• Esta estrategia de participación multisitio es generalizable para el desarrollo de terapéuticos y diagnósticos para diversas biomoléculas mutables.