Establecimiento de un Sistema de Edición Genómica Basado en CRISPR/Cas9 en Macrobrachium rosenbergii

Área de la Ciencia:

• Acuicultura y Genómica Acuática; Tecnologías de Edición Génica

Sus antecedentes:

• El langostino de agua dulce gigante (Macrobrachium rosenbergii) es una valiosa especie de acuicultura a nivel mundial.; La mejora genética de M. rosenbergii se ve obstaculizada por la ausencia de un flujo de trabajo de edición genómica eficiente.

Objetivo del estudio:

• Optimizar un sistema de microinyección CRISPR/Cas9 para mutagénesis dirigida en embriones de M. rosenbergii.; Establecer una base para la genómica funcional y la mejora genética en M. rosenbergii.

Principales métodos:

• Se utilizó una estrategia de apareamiento controlado para la recolección rutinaria de embriones de M. rosenbergii en una sola célula.; Se determinó el momento óptimo de microinyección (0,5-2 h post-fertilización) y el tamaño de la punta de la aguja (~1 μm).; Se aplicó CRISPR/Cas9 para editar el gen de desarrollo ocular MrPAX6 y el gen relacionado con el sexo MrIAG.

Principales resultados:

• La mortalidad temprana de los embriones se redujo a aproximadamente el 10% mediante técnicas optimizadas de microinyección.; La edición de MrPAX6 resultó en una tasa de mutación del 46,9% y una reducción del 50% en el área de pigmento ocular.; La edición de MrIAG logró una tasa de mutación del 84% con una supervivencia de aproximadamente el 35% hasta la eclosión.

Conclusiones:

• Se ha establecido con éxito un sistema de edición genómica CRISPR/Cas9 eficiente y reproducible para M. rosenbergii.; Este sistema optimizado proporciona herramientas esenciales para futuros estudios de genómica funcional y programas de mejora genética en M. rosenbergii.