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Updated: Jun 25, 2026

High-throughput Detection of Respiratory Pathogens in Animal Specimens by Nanoscale PCR

High-throughput Detection of Respiratory Pathogens in Animal Specimens by Nanoscale PCR

Published on: November 28, 2016

Detección de cinco virus comúnmente implicados en la enfermedad respiratoria bovina mediante amplificación isotérmica

Josiah Levi Davidson^1,2, Murali Kannan Maruthumuthu^1,2, Mohamed Kamel^1,3

¹Department of Agricultural and Biological Engineering, Purdue University, West Lafayette, IN, USA.

The veterinary quarterly

|January 12, 2026

Resumen

Desarrollamos nuevos ensayos cuantitativos de amplificación isotérmica mediada por bucle (qLAMP) para detectar cinco virus clave que causan la enfermedad respiratoria bovina (BRD). Estas pruebas rápidas y sin extracción ofrecen alta sensibilidad para mejorar el manejo de la salud del ganado.

Área de la Ciencia:

Diagnóstico Veterinario
Biología Molecular
Virología

Sus antecedentes:

La enfermedad respiratoria bovina (BRD) es una preocupación importante en la producción ganadera, a menudo causada por un complejo de virus.
La detección precisa y rápida de los agentes causales es crucial para estrategias efectivas de tratamiento y control.
Los métodos de diagnóstico existentes pueden consumir mucho tiempo y requerir un procesamiento extenso de las muestras.

Objetivo del estudio:

Desarrollar y validar nuevos ensayos cuantitativos de amplificación isotérmica mediada por bucle (qLAMP) y qLAMP de transcripción inversa (RT-qLAMP).
Detectar cinco virus principales asociados con BRD: Alphaherpesvirus Bovino Tipo 1 (BHV-1), Adenovirus Bovino Tipo 3 (BAV-3), Virus Sincitial Respiratorio Bovino (BRSV), Virus de la Diarrea Viral Bovina Tipo 1 (BVDV-1) y Virus de la Parainfluenza Bovina Tipo 3 (BPIV-3).
Establecer una canalización optimizada para el desarrollo rápido de ensayos y permitir diagnósticos en el punto de atención.

Principales métodos:

Desarrollo de ensayos qLAMP y RT-qLAMP sin extracción para la detección simultánea de cinco virus asociados con BRD.
Validación utilizando muestras artificiales con cargas virales conocidas para determinar los límites de detección (LOD).
Evaluación de la sensibilidad y especificidad analíticas utilizando protocolos establecidos.
Introducción de una canalización para el diseño, cribado, selección y caracterización eficientes de ensayos.

Principales resultados:

Los ensayos sin extracción lograron límites de detección entre 30 y 1057 copias por reacción.
Los límites de detección por hisopo variaron de 2 × 10⁵ copias (BAV-3, BHV-1) a 8.22 × 10⁶ copias (BPIV-3, BRSV, BVDV-1).
Las sensibilidades analíticas fueron del 73-100% y las especificidades del 90-100%.
Una canalización optimizada facilitó el rápido desarrollo de ensayos.

Conclusiones:

Los nuevos ensayos qLAMP y RT-qLAMP proporcionan una detección sensible y específica de los virus clave de la BRD.
Los ensayos apoyan el desarrollo de diagnósticos colorimétricos en corrales para el diagnóstico y tratamiento rápidos de la BRD.
La canalización desarrollada acelera la creación de herramientas de diagnóstico para patógenos emergentes.

Palabras clave:

Enfermedad Respiratoria Bovina LAMP desarrollo de ensayos diagnóstico en corrales detección sin extracción procesamiento mínimo de muestras BRD viral

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