Reconstitución del microambiente tumoral de cabeza y cuello con organoides de interfase aire-líquido

Área de la Ciencia:

• Oncología
• Inmunología
• Biotecnología

Sus antecedentes:

• El cáncer de cabeza y cuello (HNC) presenta importantes desafíos en el tratamiento y el desarrollo de fármacos.
• Los modelos in vitro existentes a menudo no logran replicar con precisión el complejo microambiente tumor-inmune (TME).
• El desarrollo de modelos de organoides derivados de pacientes es crucial para avanzar en la medicina personalizada.

Objetivo del estudio:

• Establecer un modelo de organoide de cáncer de cabeza y cuello (HNCO) derivado de pacientes utilizando el cultivo de interfase aire-líquido (ALI).
• Reconstruir y mantener el microambiente tumor-inmune (TME) in vitro.
• Validar la utilidad del modelo en la simulación de respuestas a la inmunoterapia y la predicción de la eficacia del tratamiento para el HNC.

Principales métodos:

• Establecimiento de modelos ALI-HNCO a partir de tejidos tumorales frescos de HNC.
• Verificación de las características oncológicas y la homología tumoral mediante análisis histomorfológico.
• Evaluación de linfocitos T y fibroblastos mediante tinción de inmunofluorescencia.
• Evaluación de la eficacia del inhibidor de PD-1 (pembrolizumab) midiendo el IFN-γ, analizando las proporciones de CD8+/CD4+ y la expresión de CD69+ mediante ELISA y citometría de flujo.
• Confirmación de la muerte de células tumorales mediada por células T mediante tinción FVS.

Principales resultados:

• El modelo ALI-HNCO mantuvo con éxito los linfocitos infiltrantes de tumores (TIL) y los fibroblastos asociados al cáncer (CAF).
• La inmunofluorescencia confirmó la presencia de linfocitos CD3+ y células SMA+, reflejando los tejidos tumorales parentales.
• Aproximadamente el 17,86% de los modelos ALI-HNCO demostraron una amplificación específica de linfocitos T CD8+, lo que indica especificidad tumoral y citotoxicidad.
• El modelo simuló los efectos del bloqueo del punto de control PD-1/PD-L1.

Conclusiones:

• Se construyó con éxito un modelo funcional de microambiente inmunitario de HNC in vitro utilizando el cultivo ALI.
• El modelo ALI-HNCO preserva la integridad estructural y celular del TME nativo.
• Este modelo sirve como una plataforma preclínica confiable para evaluar la eficacia de los fármacos de inmunoterapia y avanzar en la medicina personalizada en HNC.