Marco preanalítico para el uso clínico rutinario de biopsias líquidas: combinación de vesículas extracelulares y ADN...

Área de la Ciencia:

• Descubrimiento de biomarcadores
• Tecnologías de biopsia líquida
• Estandarización preanalítica

Sus antecedentes:

• Las biopsias líquidas ofrecen un potencial diagnóstico mínimamente invasivo.
• El uso clínico del ADN libre de células (ADNc) está creciendo.
• Las vesículas extracelulares (VE) enfrentan desafíos de variabilidad preanalítica.

Objetivo del estudio:

• Estandarizar la recolección de sangre para el aislamiento simultáneo de ADNc y VE.
• Evaluar los tubos de recolección de sangre para el análisis de biomarcadores multiómicos.
• Evaluar las variaciones preanalíticas en el procesamiento de muestras de biopsia líquida.

Principales métodos:

• Se compararon tubos de preservación de sangre y condiciones de almacenamiento.
• Se aislaron VE grandes (VEg) y VE pequeñas (VEp) utilizando ultracentrifugación y cromatografía de exclusión por tamaño.
• Se realizó extracción de ADNc, secuenciación y perfilado proteómico de VE.

Principales resultados:

• Los tubos Streck RNA, Norgen y PAX mantuvieron la pureza del ADNc durante 7 días.
• Los tubos Streck RNA demostraron el rendimiento más estable para la multiómica.
• Las VE pequeñas (VEp) mostraron una mayor variabilidad de proteínas después de 7 días de almacenamiento en comparación con las VE grandes (VEg).

Conclusiones:

• Un flujo de trabajo estandarizado permite la selección informada de tubos de biopsia líquida.
• El protocolo facilita la obtención de datos genómicos y proteómicos de VE.
• Este enfoque apoya el descubrimiento de biomarcadores multiómicos para biopsias líquidas.