Desarrollo de un dispositivo microfluídico basado en RT-LAMP colorimétrico para la detección de SARS-CoV-2

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular
• Biotecnología
• Diagnóstico Médico

Sus antecedentes:

• El diagnóstico preciso y rápido de COVID-19 es crucial para controlar la propagación del SARS-CoV-2.
• Los métodos actuales como la RT-qPCR requieren laboratorios y equipos especializados.
• La amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP) ofrece una alternativa más rápida y sencilla en condiciones isotérmicas.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un ensayo colorimétrico de transcripción inversa mediada por bucle isotérmico (RT-LAMP) para la detección de SARS-CoV-2.
• Integrar el ensayo RT-LAMP en un dispositivo microfluídico para mejorar la usabilidad.
• Evaluar el rendimiento diagnóstico del dispositivo microfluídico desarrollado.

Principales métodos:

• Diseño de cebadores RT-LAMP dirigidos a los genes conservados E y RdRp del SARS-CoV-2.
• Utilización de azul de hidroxinaftol (HNB) para la detección colorimétrica visual.
• Fabricación de un dispositivo microfluídico de polidimetilsiloxano (PDMS) con cinco cámaras de reacción.
• Prueba de ARN de hisopos nasofaríngeos utilizando el dispositivo microfluídico RT-LAMP y comparación con RT-qPCR.

Principales resultados:

• El dispositivo microfluídico RT-LAMP demostró una especificidad del 100%.
• La sensibilidad general fue del 75,8% para muestras con Ct ≤ 35.
• La sensibilidad fue mayor para muestras con valores de Ct más bajos (mayor carga viral): 100% para Ct ≤ 25, 88,6% para Ct ≤ 30 y 50% para 30 < Ct ≤ 35.

Conclusiones:

• El dispositivo microfluídico RT-LAMP colorimétrico proporciona una detección de ARN de SARS-CoV-2 simple, rápida y confiable.
• La salida visual del dispositivo y los requisitos mínimos de equipo lo hacen ideal para el punto de atención y entornos con recursos limitados.
• El rendimiento es comparable o superior a las pruebas de flujo lateral de uso común para el diagnóstico de COVID-19.