Un nuevo biosensor raciométrico basado en nanosheets de germaneno para la detección rápida y sensible de BRCA1 en la...

Área de la Ciencia:

• Ingeniería Biomédica; Biología Molecular; Inmunología

Sus antecedentes:

• El gen BRCA1 es crucial para el desarrollo y la función de los linfocitos T. El monitoreo de la expresión del ARNm de BRCA1 en células T vivas es un desafío debido a la falta de herramientas in situ efectivas.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un nanosensor fluorescente raciométrico para cuantificar el ARNm de BRCA1 en células T CD8+ vivas. Permitir la visualización y cuantificación en tiempo real de la dinámica del ARNm de BRCA1 durante la diferenciación y activación de las células T.

Principales métodos:

• Se diseñó un nanosensor basado en la transferencia de energía por resonancia de Förster (FRET) utilizando una sonda de ADN marcada con fluoresceína (FAMcDNA) y nanosheets de germaneno (GeT). El sensor utiliza una señal raciométrica (I520/I640) basada en el desprendimiento de la sonda de la nanosheet tras la hibridación con el ARNm de BRCA1. El sistema se validó en cuanto a sensibilidad, límites de detección (18,1 pM para ADN, 17,2 pM para ARNm) y tiempo de respuesta (~10 min).

Principales resultados:

• El nanosensor demostró alta sensibilidad y un tiempo de respuesta rápido para la detección de ARNm de BRCA1. La imagen raciométrica de células T CD8+ vivas reveló un aumento significativo en la relación I520/I640 tras la activación de las células T, lo que indica una regulación al alza de BRCA1. La regulación al alza observada fue consistente con los datos de RNA-seq, validando la precisión del sensor.

Conclusiones:

• El nanosensor fluorescente raciométrico desarrollado proporciona un método fiable para cuantificar el ARNm de BRCA1 en células T vivas. Esta herramienta facilita el monitoreo in situ de la expresión génica durante la diferenciación y activación de las células T. El germaneno emisor rojo muestra una gran promesa como plataforma para aplicaciones avanzadas de biosensado raciométrico.