Desarrollo y evaluación de un ensayo basado en CRISPR/Cas13 en una sola etapa para la detección de sífilis en...

Área de la Ciencia:

• Diagnóstico Molecular
• Detección de Enfermedades Infecciosas
• Diagnóstico de Sífilis

Sus antecedentes:

• Los diagnósticos actuales de Treponema pallidum subspecies pallidum (TPA) enfrentan limitaciones con los tipos de muestras y la carga patógena.
• La detección precisa y rápida de TPA es crucial para el manejo eficaz de la sífilis.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar y validar un ensayo molecular rápido en una sola etapa para la detección de TPA.
• Superar las limitaciones de los métodos de diagnóstico existentes para TPA.

Principales métodos:

• Se estableció un ensayo en una sola etapa que integra la amplificación por polimerasa con recombinasa (RPA) y la escisión colateral de Cas13a.
• Se utilizó la detección isotérmica dirigida al gen tpp47/tp0574.
• Se validó el ensayo en 186 especímenes clínicos (sangre entera, exudado de lesión, LCR).

Principales resultados:

• El ensayo RPA-Cas13a exhibió alta sensibilidad y especificidad analítica para TPA.
• Sensibilidades clínicas: 58,97 % (sangre entera), 84,21 % (exudado de lesión), 57,14 % (LCR).
• Se logró una especificidad del 100 % en todos los tipos de muestras analizadas.

Conclusiones:

• El ensayo isotérmico en una sola etapa desarrollado permite la detección rápida y precisa de TPA a partir de diversas muestras clínicas.
• La alta especificidad del ensayo y su formato amigable para el campo apoyan su uso como herramienta de diagnóstico complementaria.
• Este ensayo es prometedor para pruebas en el punto de atención y cribado en entornos con recursos limitados.