Aptasensor tri-modo de fluorescencia/colorimétrico/tira con estrategia en cascada impulsada por CRISPR/Cas12a para...

Área de la Ciencia:

• Biosensores y Nanotecnología
• Biología Molecular
• Química Analítica

Sus antecedentes:

• La detección de micotoxinas es crucial para la seguridad alimentaria, pero los métodos actuales enfrentan desafíos en cuanto a accesibilidad y eficiencia.
• Los biosensores multimodales ofrecen detección rápida, pero la implementación práctica sigue siendo difícil.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un aptasensor tri-modo para la cuantificación ultrasensible de ocratoxina A (OTA).
• Aprovechar una estrategia en cascada impulsada por CRISPR/Cas12a para mejorar el rendimiento de la detección.

Principales métodos:

• Preparación de sondas prediseñadas: Apt@cDNA, reportero de fluoróforo-quencher (FQ) y reportero de glucosa oxidasa (GOx).
• Utilización de una cascada CRISPR/Cas12a desencadenada por OTA para la amplificación de la señal a través de la reacción CHA y la generación de H2O2.
• Integración de modos de detección de fluorescencia, colorimétrico y de tira.

Principales resultados:

• Se logró una detección ultrasensible de OTA con límites de detección (LOD) tan bajos como 9,10 pg/mL.
• Se demostró especificidad, precisión y practicidad satisfactorias en muestras fortificadas y reales.
• Se destacó la capacidad cuantitativa, la reacción homogénea y la operación simplificada.

Conclusiones:

• El aptasensor tri-modo desarrollado proporciona una plataforma sensible y eficiente para la detección de OTA.
• La amplificación de la señal impulsada por CRISPR/Cas12a ofrece un enfoque versátil para el monitoreo de sustancias nocivas.
• Esta plataforma muestra perspectivas prometedoras para aplicaciones prácticas en seguridad alimentaria y campos relacionados.