Método práctico para la obtención de imágenes del glicocálix endotelial en tejidos fijados en formalina e incluidos...

Área de la Ciencia:

• Biología Vascular
• Histología
• Imagen Biomédica

Sus antecedentes:

• El glicocálix endotelial (eGCX) es crucial para la homeostasis vascular, pero es difícil de estudiar debido a su fragilidad.
• Los métodos convencionales para la visualización del eGCX son complejos, costosos y requieren tejidos frescos, lo que limita su uso clínico.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un método práctico y accesible para visualizar y fenotipar el eGCX en tejidos fijados en formalina e incluidos en parafina (FFPE).
• Permitir la evaluación semicuantitativa de la morfología del eGCX y los cambios patológicos en especímenes clínicos de FFPE.

Principales métodos:

• Se utilizó una fijación especializada con azul de Alcian en cortes de tejido FFPE.
• Se integró la tinción de realce con plata con la microscopía electrónica de barrido de bajo vacío para la visualización del eGCX.
• Se desarrolló un índice basado en el grosor para la fenotipificación semicuantitativa del eGCX.

Principales resultados:

• Se visualizó con éxito el eGCX en varios lechos vasculares (cerebro, plexo coroideo, retina) utilizando cortes de FFPE.
• Se demostraron altas sensibilidades en la detección de alteraciones patológicas del eGCX, incluida una pérdida significativa en modelos de oclusión de la vena retiniana.
• Se aplicó el flujo de trabajo a especímenes quirúrgicos colorrectales humanos, visualizando el eGCX en muestras clínicas de FFPE.

Conclusiones:

• El método desarrollado compatible con FFPE proporciona un enfoque accesible para la obtención de imágenes de campo amplio del eGCX.
• Esta técnica facilita la fenotipificación orientada a la patología del glicocálix endotelial tanto en entornos de investigación como clínicos.
• El método supera las limitaciones de las técnicas tradicionales, mejorando el estudio de la estructura y función del eGCX.