El perfilamiento cinético en inmunoensayos digitales de un solo paso permite la cuantificación múltiple a través de...

Área de la Ciencia:

• Biosensing es el uso de biosensores.
• Química Analítica La Química Analítica es la
• La biofísica es la biofísica.

Sus antecedentes:

• Los inmunoensayos en sándwich de un solo paso pueden sufrir el efecto gancho a altas concentraciones de analito, lo que lleva a resultados inexactos.
• El efecto gancho ocurre cuando el exceso de analito inhibe la formación de complejos sándwich, lo que complica el análisis cuantitativo.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un marco cinético para resolver la ambigüedad causada por el efecto gancho en los ensayos inmunológicos.
• Para permitir la cuantificación precisa de los biomarcadores en un amplio rango dinámico, incluidas las altas concentraciones.
• Para abordar y minimizar la reactividad cruzada en aplicaciones multiplexadas de biosensores.

Principales métodos:

• Utilizó señales plasmónicas de una sola partícula con resolución temporal de matrices de nanoagujeros de oro con reporteros de nanopartículas.
• Se rastrearon los eventos individuales de unión y se analizaron los perfiles de tiempo de respuesta utilizando modelos de transporte masivo y de reacción limitada.
• Desarrolló un marco digital para clasificar y desacoplar la reactividad cruzada en ensayos multiplexados.

Principales resultados:

• Identificó la transición cinética responsable del efecto gancho mediante la comparación de los residuos de ajuste.
• Convertido el efecto gancho en una característica cuantitativa mediante la comprensión de la cinética subyacente.
• Aplicó con éxito el enfoque de detección múltiple de citoquinas y proteína C reactiva en suero humano sin procesar.
• Permitió la cuantificación simultánea de biomarcadores que abarcan más de 9 órdenes de magnitud sin división o dilución de la muestra.

Conclusiones:

• Estableció un paradigma de biosensing cinético generalizable, consciente de la reactividad cruzada.
• La estrategia mecanicista supera las limitaciones de los inmunoensayos tradicionales para muestras biológicas complejas.
• Este enfoque mejora la precisión y el rango dinámico de la cuantificación de biomarcadores en el diagnóstico clínico.