Protocolo robusto, escalable y libre de xenoinjertos para diferenciar células madre pluripotentes inducidas humanas...

Área de la Ciencia:

• Biología de Células Madre
• Inmunología
• Terapia Celular

Sus antecedentes:

• Los macrófagos derivados de células madre pluripotentes inducidas humanas (hiPSCs) (iMacs) muestran una gran promesa para las inmunoterapias celulares alogénicas.
• La falta de protocolos de diferenciación eficientes, escalables y compatibles con las Buenas Prácticas de Fabricación (GMP) dificulta la traslación clínica.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un protocolo robusto, escalable y compatible con GMP para diferenciar hiPSCs de grado clínico en iMacs funcionales.
• Optimizar las condiciones de diferenciación para la traducción inmediata a GMP.

Principales métodos:

• Se diferenciaron hiPSCs hacia mesodermo a través de la formación de cuerpos de embrioides (EB) en cultivo 3D.
• Se indujeron progenitores mieloides a partir de EBs y se diferenciaron aún más en iMacs M1 o M2 utilizando una plataforma G-Rex.
• Se evaluó la diferenciación, pureza y función mediante citometría de flujo, ensayos de fagocitosis, ELISA y tinción de May-Grünwald Giemsa.

Principales resultados:

• Se logró una pureza media del 98% de iMacs viables.
• Se demostró un pliegue medio de diferenciación de 250X a partir de una sola hiPSC.
• Se utilizaron reactivos libres de alimentadores, escalables y traducibles a GMP en todo el protocolo.

Conclusiones:

• El protocolo desarrollado produce eficientemente iMacs funcionales a partir de hiPSCs de grado clínico.
• Este método escalable es adecuado para la fabricación GMP y facilita el avance de los iMacs en inmunoterapias celulares.